明美熒光顯微鏡應(yīng)用于農(nóng)藥代森鋅錳(MZ)心臟毒性分子機(jī)制研究

華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院生殖健康研究所章慧平教授課題組于Ecotoxicology and Environmental Safety雜志在線發(fā)表標(biāo)題為“Cardiac developmental toxicity and transcriptome analyses of zebrafish(Danio rerio) embryos exposed to Mancozeb”的研究論文，揭示了代森鋅錳(MZ)暴露誘導(dǎo)斑馬魚心臟發(fā)育損傷的分子機(jī)制。
 

代森錳鋅(MZ)是一種抗菌農(nóng)藥，已被證實(shí)與生殖毒性、神經(jīng)毒性和內(nèi)分泌紊亂有關(guān)。然而，MZ是否有心臟毒性尚不清楚。研究了環(huán)境相關(guān)MZ濃度在1.88 ~ 7.52 μM范圍內(nèi)對(duì)斑馬魚幼體的心臟毒性作用。轉(zhuǎn)錄組測(cè)序通過富集分析京都基因和基因組百科全書(KEGG)和基因本體論(GO)預(yù)測(cè)MZ誘導(dǎo)斑馬魚心臟發(fā)育毒性的機(jī)制，與形態(tài)變化相一致，osm、pfkfb3、foxh1、stc1、nrarpb基因可能通過激活NOTCH信號(hào)通路影響斑馬魚心臟的正常發(fā)育，導(dǎo)致心包水腫、心肌纖維化、心區(qū)充血。差異基因表達(dá)分析顯示，MZ治療后cyp1c2、cyp3c3相關(guān)基因表達(dá)顯著上調(diào)，這可能與心肌細(xì)胞凋亡有關(guān)。實(shí)時(shí)定量RT-qPCR和吖啶橙染色證實(shí)了上述結(jié)果。我們的研究結(jié)果表明，MZ介導(dǎo)的斑馬魚幼體心臟毒性發(fā)育可能與Notch信號(hào)通路的激活和凋亡相關(guān)信號(hào)通路有關(guān)。

華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院生殖健康研究所王永鳳碩士為該論文作者，章慧平教授和劉春艷講師為該論文通訊作者。本研究受國(guó)家研發(fā)項(xiàng)目的資助（2018YFC1004300，2018YFC1004304）。

以下結(jié)果圖片均截取自文中（使用廣州明美的體視熒光顯微鏡MZX81和研究級(jí)正置熒光顯微鏡MF43-N搭配明美高靈敏顯微相機(jī)MS23拍攝）

• 
  應(yīng)用范圍：動(dòng)物活體成像、模式生物（線蟲、果蠅及斑馬魚等）觀察、雞胚胎鑒定及司法刑偵等

• 光路設(shè)計(jì)：伽利略光學(xué)系統(tǒng)（LED熒光雙光路照明設(shè)計(jì)）

• 熒光模塊：雙色體視熒光模塊，紫外光源外置

• 常搭配相機(jī)：MSX2、MS23、MC50-S

• 
  應(yīng)用范圍：生物切片、生物細(xì)胞、細(xì)菌、流質(zhì)沉淀；透明或半透明物體、粉末、細(xì)小顆粒 •觀察方式：熒光、明場(chǎng)、相差、暗場(chǎng)等 

• 熒光附件：6孔轉(zhuǎn)盤式熒光模塊設(shè)計(jì)，可靈活轉(zhuǎn)換熒光激發(fā)塊 

• 熒光光源：大功率寬光譜LED光源、多通道LED光源、汞燈可選

• 明場(chǎng)光源：搭配合理優(yōu)異的光路設(shè)計(jì)，保證視野成像無場(chǎng)曲 

• 常搭配相機(jī)：MSX2、MSX11、MSX11-C、MSH12、MSH05、MC50-S、MS23

 

圖1. MZ處理后斑馬魚幼蟲的表型。(A) A -e是放大2.5倍的心臟，A -e是放大5.0倍的心臟。(B-D)斑馬魚幼體心臟畸形率、心包水腫、心率。紅色箭頭表示心包。星號(hào)(*)表示處理組與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p < 0.05) (**p < 0.01;* * * p < 0.001)。每組15條幼魚。(讀者可參考本文的網(wǎng)絡(luò)版，以解釋本圖例中有關(guān)顏色的參考資料。)

圖2. 反映96 hpf時(shí)不同MZ濃度對(duì)斑馬魚心臟組織影響的代表性圖像。每組15條幼魚。對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p < 0.01)(圖1D)。

圖3. 暴露于96 hpf不同濃度MZ對(duì)斑馬魚心臟發(fā)育毒性的影響(A) A -e是放大2.5倍的心臟，A -e是放大5.0倍的心臟。紅色箭頭表示心房和心室，藍(lán)色箭頭表示充血區(qū)。(B)各濃度組心臟充血定量統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。(C)各濃度組心室、心房面積定量分析結(jié)果。星號(hào)(*)表示兩者之間有顯著差異(p < 0.05)

圖4. 吖啶橙(AO)染色檢測(cè)MZ在96 hpf時(shí)誘導(dǎo)斑馬魚幼體凋亡。紅色箭頭表示凋亡信號(hào)。(D) j圖像量化AO染色中有亮點(diǎn)區(qū)域的相對(duì)熒光，星號(hào)(*)表示治療組與對(duì)照組之間有顯著差異(p < 0.05) (**p < 0.01);* * * p < 0.001)。每組15條幼魚。

圖A1.不同濃度MZ處理后斑馬魚心包水腫的表型。心臟放大2.0倍

圖A3.不同MZ濃度下斑馬魚心臟的凋亡信號(hào)。心臟放大2.0倍。

免責(zé)聲明
本站無法鑒別所上傳圖片、字體或文字內(nèi)容的版權(quán)，如無意中侵犯了哪個(gè)權(quán)利人的知識(shí)產(chǎn)權(quán)，請(qǐng)來信或來電告之，本站將立即予以刪除，謝謝。 
來源：https://www.mshot.com/article/1405.html