高架十字迷宮、曠場實驗中的缺氧抑郁模型鼠的行為

有頭吳腦說行為，大家好，我是吳文遠(yuǎn)。

本文主要探討銀杏內(nèi)脂 GB對大鼠缺氧模型焦慮樣行為的改善作用。

1材料和方法

1.1實驗動物

SPF級成年雄性SD大鼠36只，體質(zhì)量（200±20）g。

1.2試劑與儀器

高原人工實驗艙；EPM實驗儀器（型號：XR－XG201，上海欣軟信息科技有限公司）；OFT實驗儀器（型號：XR－XZ301，上海欣軟信息科技有限公司）；SuperMaze動物行為學(xué)視頻分析系統(tǒng)（上海欣軟信息科技有限公司）；GB（貨號：純度＞９８％，上海源葉生物科技有限公司）。

1.3實驗分組

SD大鼠飼養(yǎng)方法及分組將SD大鼠在新環(huán)境下先飼養(yǎng)適應(yīng)3d。所有大鼠均飼養(yǎng)在動物房中，保持室內(nèi)溫度（25±1）℃，每天12h晝夜交替，給予同種飼料喂養(yǎng)，可自由進食、飲水，采用玉米粒做墊料，每兩天更換一次。實驗時將大鼠分為3組，分別為平原對照組、高原缺氧組、GB干預(yù)組，各12只。

1.4模型鼠的制造

GB干預(yù)組大鼠在進入高原人工實驗艙之前每天固定時間給與120mg／kg劑量的GB灌胃，連續(xù)給藥4d后與高原缺氧組大鼠一起進入高原人工實驗艙。平原對照組大鼠一直在動物房中常規(guī)條件飼養(yǎng)。高原缺氧模型依托高原人工實驗艙平臺，以平原常氧條件飼養(yǎng)大 鼠為平原對照組，以高原人工實驗艙內(nèi)模擬6000ｍ 高原缺氧環(huán)境，高原缺氧組和 GB干預(yù)組在艙內(nèi)6d。

1.5動物行為學(xué)實驗

實驗開始之前，徹底清潔實驗裝置，采用窗簾將OFT和EPM與外界環(huán)境分隔開，室內(nèi)暗光（以1.5m距離處能區(qū)分大鼠細(xì)微活動的最低亮度為準(zhǔn)）并保持恒亮，室溫20℃左右，測試過程中保持周圍環(huán)境安靜。設(shè)置好相關(guān)程序參數(shù)，其中攝影記錄為延遲5S記錄，共記錄300s。大鼠出艙后將其放置在實驗室半小時以適應(yīng)環(huán)境。實驗開始時，將大鼠背對實驗者從籠中取出（每次一只大鼠），放入曠場以及十字迷宮裝置的中心，實驗者立刻離開，使用動物行為軌跡跟蹤系統(tǒng)采集大鼠在300s內(nèi)的活動信息。每只大鼠在完成測試后，使用75％酒精將設(shè)備擦洗干凈后，再進行下一只大鼠的測試。

1.6實驗中需要記錄的評價指標(biāo)

OFT實驗動物出現(xiàn)焦慮心理時，其對開闊環(huán)境和新異環(huán)境中的恐懼和探究的矛盾心理特性會反應(yīng)在行為學(xué)上，表現(xiàn)為焦慮越嚴(yán)重，就越傾向于在周邊區(qū)域活動，以獲得一種安全感。因此，實驗動物進入中央?yún)^(qū)域的次數(shù)越多，在中央?yún)^(qū)域活動的時間越長則說明動物的焦慮情緒越低。觀察實驗動物的運動總路程（ｃM）、進入中心區(qū)域時間（S）、進入中心區(qū)域次數(shù)（ｎ）。
EPM實驗主要是利用動物對新異環(huán)境的探究和對高懸開臂的恐懼形成矛盾心理來反應(yīng)動物的焦慮狀態(tài)。大鼠進入開臂時間和次數(shù)越多，說明大鼠焦慮程度越低，反之則說明其焦慮程度越高。觀察實驗動物的運動總路程（ｃM）、開臂時間百分比（％）、開臂次數(shù)百分比（％）。
 

1.7統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ｘ珚±S）表示，兩組間比較采用ｔ檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 OFT結(jié)果

由動物行為軌跡跟蹤系統(tǒng)采集的大鼠運動軌跡可以看到高原缺氧組大鼠相較于平原對照組大鼠在中央?yún)^(qū)域的運動軌跡明顯減少，而GB干預(yù)組大鼠在中央?yún)^(qū)域的活動時間則和平原對照組相近。統(tǒng)計學(xué)分析后可以看出在到運動總路程、進入中心區(qū)域時間和次數(shù)上，高原缺氧組顯著低于平原對照組和GB干預(yù)組，組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（F＝10.991，P＜0.01），而平原對照組和GB干預(yù)組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），GB干預(yù)組與高原缺氧組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。以上結(jié)果說明高原缺氧環(huán)境會導(dǎo)致大鼠產(chǎn)生焦慮樣行為，而GB的預(yù)給藥可以改善大鼠的焦慮狀態(tài)。

 

由動物行為軌跡跟蹤系統(tǒng)采集的大鼠運動軌跡可以看出高原缺氧組大鼠相較于平原對照組大鼠在開臂區(qū)的運動軌跡明顯減少，而GB干預(yù)組大鼠在開臂區(qū)的活動時間則和平原對照組相近。運動總路程、開臂區(qū)活動時間百分比和進入次數(shù)百分比上，高原缺氧組顯著低于平原對照組和GB干預(yù)組，組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（F＝11.016，P＜0.05），但平原對照組與GB干預(yù)組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），GB干預(yù)組與高原缺氧組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

3討論

在OFT中，平原 對照組大鼠進入中央?yún)^(qū)域時間、次數(shù)以及運動總路程顯著高于高原缺氧組，在EPM試驗中進入開臂時間和次數(shù)百分比 也顯著高于高原缺氧組，組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在 OFT和 EPM試驗中，GB干預(yù)組的各項檢測指 標(biāo)較高原缺氧組有顯著的升高，組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。因此，預(yù)先給予GB可以有效緩解高原缺氧 導(dǎo)致的大鼠焦慮樣行為。