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COVID-19質(zhì)譜檢測展望:基于SCIEX Echo MS系統(tǒng)的超高通量檢測

瀏覽次數(shù):848 發(fā)布日期:2022-7-4  來源:SCIEX
紐約——SCIEX證明聲波激發(fā)液體進(jìn)樣Echo™ MS系統(tǒng)與基于質(zhì)譜的肽定量工作流程的兼容性,從而將該系統(tǒng)應(yīng)用范圍從小分子工作流程擴(kuò)展到生物制藥開發(fā)和大規(guī)模蛋白質(zhì)生物標(biāo)記物研究等應(yīng)用。
 
在2022年3月舉行的美國人類蛋白質(zhì)組組織(US HUPO)年會上,來自位于馬薩諸塞州弗雷明翰的SCIEX科學(xué)家們提供了原始數(shù)據(jù)證明,該公司由生命科學(xué)巨頭Danaher所有,該公司的Echo MS系統(tǒng)可以每秒檢測多達(dá)三個樣本,應(yīng)用于肽段定量工作流程分析肽段,該工作流程利用穩(wěn)定同位素標(biāo)記并通過抗肽抗體(SISCAPA)捕獲肽段。
 
SCIEX液相和集成解決方案高級總監(jiān)Gavin Fischer表示,該公司現(xiàn)在開始使用基于上述系統(tǒng),開發(fā)肽段定量應(yīng)用。他補(bǔ)充道,雖然其最初的目標(biāo)是生物制藥工作流程中的肽段定量,但也可以擴(kuò)展到蛋白生物標(biāo)記物研究。Fischer說,公司研究人員在方法開發(fā)過程中,使用了一組來源于SARS-CoV-2核衣殼蛋白的20個肽段。
 
Echo MS系統(tǒng)是SCIEX和Labcyte合作開發(fā)的,該系統(tǒng)使用聲波激發(fā)液體處理將樣品快速噴射到質(zhì)譜儀中。SCIEX于2020年推出該系統(tǒng),并已將其主要用于小分子分析方法。在美國HUPO上的詳細(xì)工作展示,旨在表明該系統(tǒng)也可用于分析肽段和蛋白質(zhì)等大分子。
 
Echo MS系統(tǒng)可能會引起蛋白生物標(biāo)記物研究人員的興趣,因為它將允許進(jìn)行超高通量實驗。例如,F(xiàn)ischer指出,在探索使用該設(shè)備進(jìn)行肽段測定的第一個項目中,SCIEX團(tuán)隊在含有約100個肽段的β-半乳糖苷酶蛋白質(zhì)的消化物中定量了一對β-半乳糖苷酶肽段。通過Echo MS系統(tǒng),能夠在5小時內(nèi)對10260個樣本中的2種肽段進(jìn)行定量。如果使用傳統(tǒng)的液相色譜質(zhì)譜儀進(jìn)行同樣的實驗,需要運(yùn)行大約7分鐘的液相色譜梯度,那么幾乎需要50天的全天候質(zhì)譜檢測工作。“我們正在研究高通量肽段定量,”Fischer說,并指出研究人員將系統(tǒng)設(shè)置為每1.5秒分析一個樣本。“我們在整個樣品板上獲得了很好的重現(xiàn)性,很好的變異系數(shù)。”
 
SCIEX團(tuán)隊遵循最初的Echo MS系統(tǒng)工作流程,使用SISCAPA工作流程進(jìn)行實驗,該工作流程使用前期抗體富集目標(biāo)肽段來測定20個SARS-CoV-2肽段。SCIEX首席應(yīng)用科學(xué)家兼該項目負(fù)責(zé)人Christie Hunter在一封電子郵件中表示,SISCAPA是一種很有前途的利用Echo MS系統(tǒng)進(jìn)行蛋白定量的技術(shù),因為前期抗體富集足以簡化樣品,使其在無需液相分離的情況下即可進(jìn)行分析。
 
她指出:“這里的關(guān)鍵是找到正確的前期樣品制備方法,簡化蛋白組學(xué)樣品,從而使液體流動注射方法可行。” “目標(biāo)肽段的抗體富集非常引人注目方法,是與Echo MS系統(tǒng)配對的合適樣品制備工作流程,高度自動化,執(zhí)行速度快,制備出高度富集的樣品,并且可以根據(jù)目標(biāo)蛋白的靈敏度進(jìn)行調(diào)整。” 她補(bǔ)充說,這樣的工作流程“可以針對那些有大量蛋白質(zhì)組樣本需要分析并想要定量一小部分蛋白質(zhì)的實驗室。”
 
Fischer說,研究人員研究了20種肽段的定量限(LOQ),發(fā)現(xiàn)該系統(tǒng)采用比較靈敏的肽段分析方法平均LOQ為1 fmol/µL,可將其目標(biāo)分析物定量至0.4 fmol/µL至3.7 fmol/µL。“[美國HUPO]的演示,非常有力地證明了我們的儀器可以做非小分子的工作,”他補(bǔ)充說,公司現(xiàn)在計劃“在Echo MS系統(tǒng)上測試更大的分子和不同質(zhì)量的分子,并在更多的工作流程擴(kuò)展到更多的市場時,向客戶演示該系統(tǒng)實用性。”
 
當(dāng)被問及該系統(tǒng)是否可以用于血漿中肽段的靶向定量等應(yīng)用時,F(xiàn)ischer表示,公司尚未通過實驗證明這一點,但“有理論證據(jù)相信這個應(yīng)用可以實現(xiàn)。”他指出,SCIEX已證明該系統(tǒng)能夠定量血漿中的小分子。
 
他說:“我們正致力于將[這項技術(shù)]應(yīng)用到更多不同的基質(zhì)中,并探索更大尺寸的包膜蛋白分析,從肽段到完整蛋白。” “我們將繼續(xù)打破所有這些研究方向的邊界。”公司將尋求將該技術(shù)應(yīng)用于其他市場,包括潛在的蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物研究。
 
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聲明:SCIEX Echo™ MS系統(tǒng)、SCIEX Triple Quad™ 5500+系統(tǒng)和SCIEX Triple Quad™ 7500系統(tǒng)在中國為非醫(yī)療器械,僅能用于科研用途,不得用于以診斷為目的病人檢測。
 
 
參考文獻(xiàn)與信息
1.新聞來源:https://www.genomeweb.com/proteomics-protein-research/sciex-developing-peptide-quantitation-assays-using-acoustic-ejection
2. 獲取有關(guān)SCIEX Echo™ MS系統(tǒng)的更多信息,請訪問 https://sciex.com.cn/products/integrated-solutions/Echo-ms
來源:SCIEX
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