小麥粉中嘔吐毒素檢測的高通量固相萃取方法

嘔吐毒素，也叫做脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON) ，是一種單端孢霉烯族化合物，由于該毒素能夠引起動物嘔吐等中毒癥狀， 故而稱為嘔吐毒素。小麥作為主食作物，是嘔吐毒素分布最廣的作物之一。

在小麥生產(chǎn)加工的過程中， 嘔吐毒素伴隨著面粉的制成存在于小麥粉中，嚴(yán)重危及人們的身體健康。因此，精準(zhǔn)快速地檢測糧食作物及其制成品中嘔吐毒素含量，對于保證食品安全具有重要的意義。
 

圖片來源：攝圖網(wǎng)

 

逗點(diǎn)生物采用自主研發(fā)的24孔Copure® 230多功能凈化板，實(shí)現(xiàn)了嘔吐毒素的快速、高通量檢測。

建立小麥粉中嘔吐毒素檢測的LC檢測方法，LC方法中兩個水平（200 ng/g，400 ng/g）的加標(biāo)回收率均在90-110 %之間，孔間回收率CV值小于5 %。本方法操作簡便快捷，具有回收率高和除雜效果好的優(yōu)勢，能夠作為小麥粉中嘔吐毒素檢測的參考方法。

參照《GB 5009.111-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙�；�衍生物的測定 》
 

一、樣品前處理

1.1  樣品提取

1）稱取2 g樣品，加入20 mL乙腈-水溶液（9+1）混合均勻。

2）渦旋15 min后，6000 r/min離心5 min，取上清液，待凈化用。

 

1.2  樣品凈化
 

Copure® 230多功能凈化板(貨號：COAF230-GTL)

 

1）將24孔凈化板放置在24孔收集板上，再向凈化板孔中加入6 mL樣品提取液。

2）將24孔凈化板和收集板放置在24孔正壓提取裝置下，開啟氣閥開關(guān)，使凈化板孔和輸氣孔保持對應(yīng)，匹配良好。

3）調(diào)整氣體輸出壓力，使樣品提取液過濾至收集板中。

4）取4 mL樣品凈化液，40℃下氮?dú)獯蹈�，�? mL初始流動相復(fù)溶，渦旋30s溶解殘?jiān)�，過0.22 μm微孔濾膜，上機(jī)分析。

二、儀器條件

儀器設(shè)備：UltiMate 3000，配DAD檢測器

（Thermo Fisher Scientific）

色譜柱：Agilent ZORBAX  C18 

(4.6 mm×250 mm，5 μm)

流動相： A：甲醇    B：去離子水  

流動相梯度：見表1

流速：0.8 mL/min

柱溫：35℃

進(jìn)樣體積：50.0 mL

檢測波長：218 nm


表1  流動相洗脫程序
 

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

圖1 使用多功能凈化板處理前后的色譜圖

①小麥粉樣品-未凈化處理   ②Copure® 230多功能凈化板-凈化處理 
 

從圖1中可知，經(jīng)過Copure® 230多功能凈化板凈化處理后，上機(jī)液中雜質(zhì)被明顯吸附，色譜圖中雜峰更少，目標(biāo)峰旁邊無干擾峰，定量更準(zhǔn)確；24個孔中嘔吐毒素的回收率均在90-110%之間，孔間回收率CV值小于5 %，能滿足實(shí)驗(yàn)使用需求。

表2  LC方法加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

圖2 使用Copure® 230多功能凈化板凈化后的加標(biāo)樣品色譜圖（200 ng/g）
 

四、訂購信息