三維活體成像在核酸遞送系統(tǒng)對左心室肥厚的正反療效研究中的應(yīng)用

圖示：SS-HPT/Drd5 siRNA或SS-HPT/Drd5質(zhì)粒復(fù)合物介導(dǎo)左心室肥厚惡化或改善的機制

實驗結(jié)果（部分）：

SS-HPT/Drd5復(fù)合物的表征及體外基因表達測定S-HPT通過靜電作用壓縮Drd5核酸形成納米復(fù)合物，由瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果可知（圖1a），重量比為2時，SS-HPT可完全縮合Drd5。通過內(nèi)吞和微胞飲作用，SS-HPT/Drd5復(fù)合物可內(nèi)化到細胞中。由于二硫鍵的還原性，SS-HPT被降解為小分子，促進Drd5 siRNA或Drd5質(zhì)粒釋放。無SS-HPT的Drd5核酸遞送則不會改變細胞中D5R的表達。
另一方面，分別檢測SS-HPT和聚乙烯亞胺（PEI）在H9c2細胞中遞送Drd5 siRNA或Drd5質(zhì)粒的效果，Western blotting和RT-PCR結(jié)果顯示，與PEI相比，SS-HPT/Drd5 siRNA組中，D5R蛋白表達及其mRNA的下降幅度更大，而SS-HPT/Drd5質(zhì)粒組中，D5R的表達增幅更大，說明SS-HPT具有更好的遞送效果(圖1f，g)。

SS-HPT/Drd5復(fù)合物在患有左心室肥厚的TAC小鼠中的體內(nèi)分布

將熒光染料CY7與SS-HPT偶聯(lián)后，與Drd5質(zhì)粒或Drd5 siRNA混合，經(jīng)尾靜脈注射到TAC處理后2周的小鼠以及模擬對照組小鼠體內(nèi)。利用熒光發(fā)射斷層掃描技術(shù)（FLECT/CT）檢測SS-HPT/Drd5復(fù)合物在小鼠體內(nèi)的分布情況。TAC后6周處死小鼠，并收集心臟和腎臟組織（圖2a）。

根據(jù)所獲得的FLECT/CT三維熒光掃描圖像，可清晰觀察到SS-HPT/Drd5復(fù)合物在小鼠心臟和肝臟部位富集，熒光定量分析結(jié)果顯示，TAC小鼠心臟部位的熒光強度比對照組小鼠高出兩倍，但兩組小鼠肝臟中的熒光強度相似(圖2b-d)，說明相較于其他器官，SSHPT/Drd5復(fù)合物可以更好地運送至TAC小鼠受損的心臟中，并通過肝臟進行分解代謝。

SS-HPT/Drd5復(fù)合物對左心室肥厚的正反療效探究

TAC小鼠心臟D5R蛋白表達隨時間呈下降趨勢（圖3a）。
研究人員進一步檢測了用SS-HPT/Drd5 siRNA或SS-HPT/Drd5質(zhì)粒處理后，TAC小鼠心臟的病變情況。結(jié)果顯示，相較于對照組小鼠，TAC小鼠的心臟更大，心臟重量/體重比增加；用SS-HPT/Drd5 siRNA處理的TAC小鼠心臟進一步增大，心肌細胞肥大的癥狀加重；而SS-HPT/Drd5質(zhì)�？梢詼p輕TAC小鼠左心室肥厚的發(fā)展，改善相關(guān)癥狀（圖3b-d），說明SS-HPT/Drd5質(zhì)粒對壓力超負荷引起的左心室肥厚具有治療作用。

相關(guān)機制性研究表明，在左心室肥厚的早期階段，SS-HPT/Drd5質(zhì)粒可引起心臟特異性的D5R表達增加，通過防止氧化、減輕自噬失調(diào)以及預(yù)防心肌細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，有效減輕心臟肥大和纖維化；相比之下，SS-HPT/Drd5 siRNA則會促進左心室肥厚的發(fā)展，加速心肌功能惡化至心力衰竭。這些發(fā)現(xiàn)可以為左心室肥厚或心力衰竭患者進行D5R補充治療提供理論依據(jù)。

技術(shù)聚焦：

心臟特異性的Drd5核酸遞送有望成為一種有效的左心室肥厚治療方法。在此類靶向治療策略的研究過程中，需要對SS-HPT遞送核酸藥物后的體內(nèi)分布情況進行監(jiān)測。熒光發(fā)射斷層掃描（FLECT/CT）技術(shù)可以很好地滿足研究人員的監(jiān)測需求，對遞送系統(tǒng)偶聯(lián)的熒光信號進行無損耗的三維重現(xiàn)，有效解決傳統(tǒng)成像設(shè)備熒光探測深度不夠、二維光斑不能精確定位和重建等問題，直觀而準確地呈現(xiàn)藥物系統(tǒng)在實驗動物體內(nèi)的富集部位。在心血管疾病研究領(lǐng)域，F(xiàn)LECT/CT對于活體動物的靶向成像功能，可以有效縮短實驗設(shè)計流程，減少時間和動物消耗，為研究人員提供快速且有效的藥效評估手段。

若您想要了解更多關(guān)于 FLECT/CT系統(tǒng)的內(nèi)容，或預(yù)約使用FLECT/CT設(shè)備進行相關(guān)實驗，歡迎您通過以下方式聯(lián)系我們：

孫元元（技術(shù)部）
Tel：13810818543
柴丹（銷售部）
Tel：13810910943
田建華（應(yīng)用工程師）
Tel：18302907782
張婷瑞（應(yīng)用工程師）
Tel：13910490151
聯(lián)系郵箱：sales@bio-one.cn
您還可以通過訪問以下網(wǎng)站了解更多關(guān)于小動物3D熒光斷層掃描成像的詳細內(nèi)容：

      北京博益?zhèn)�業(yè)儀器有限公司，作為TriFoil Imaging在中國的銷售服務(wù)商和技術(shù)服務(wù)中心，致力于將其優(yōu)越的活體三維熒光斷層掃描成像產(chǎn)品推薦給更多潛在的用戶，為廣大科研及醫(yī)療工作者的研究過程提供有力助力。歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號以查看更多相關(guān)報道。歡迎您就產(chǎn)品、應(yīng)用及實驗等感興趣的方面與我們交流。