【激光顯微切割小課堂】組織中的精密空間蛋白質(zhì)組學(xué)信息

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A. Mund, F. Coscia, A. Kriston, R. Hollandi, F. Kovács, A.-D. Brunner, E. Migh, L. Schweizer, A. Santos, M. Bzorek, S. Naimy, L.M.Rahbek-Gjerdrum, B. Dyring-Andersen, J. Bulkescher, C. Lukas, M.A. Eckert, E. Lengyel, C. Gnann, E. Lundberg, P. Horvath, M. Mann:深層視覺蛋白質(zhì)組學(xué)定義單細(xì)胞的同一性和異質(zhì)性《Nature Biotechnology》（2022年）第40卷，1231–1240頁(yè) DOI：10.1038/s41587-022-01302-5

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單獨(dú)切除細(xì)胞培養(yǎng)物中的細(xì)胞核，使用已知且未表征蛋白定義的蛋白質(zhì)組學(xué)譜對(duì)不同的細(xì)胞狀態(tài)進(jìn)行分類。在存檔的原發(fā)性黑色素瘤組織中，DVP ^[1] 將空間分辨的蛋白質(zhì)組變化鑒別為正常的黑色素細(xì)胞轉(zhuǎn)化為完全侵襲性黑色素瘤，這揭示了隨著腫瘤進(jìn)展而以空間方式變化的路徑，如轉(zhuǎn)移性垂直生長(zhǎng)中的mRNA剪接調(diào)節(jié)異常與干擾素信號(hào)和抗原呈遞降低同時(shí)進(jìn)行。DVP在組織背景中保留精密空間蛋白質(zhì)組學(xué)信息的能力對(duì)臨床樣本分子表達(dá)譜具有一定的意義。

在本研究中，細(xì)胞或細(xì)胞核使用LMD7激光顯微切割顯微鏡進(jìn)行切割，該顯微鏡經(jīng)過調(diào)整，適用于自動(dòng)化的單細(xì)胞自動(dòng)切割^[1]。

圖1：A) 輸卵管上皮細(xì)胞激光顯微切割前在LMD7軟件中的輪廓對(duì)齊B) 激光顯微切割后的截圖。C) 單個(gè)輸卵管上皮細(xì)胞激光顯微切割后的384孔檢查。

視頻1：自動(dòng)化LDM單細(xì)胞分離,

References：

1.Automated Laser Microdissection for Proteome Analysis (Deep Visual Proteomics), Flyer, Leica Microsystems, 2022.

2.Rosenberger FA, Thielert M, Strauss MT, Ammar C, Mädler SC, Schweizer L, Metousis A, Skowronek P, Wahle M, Gote-Schniering J, Semenova A, Schiller HB, Rodriguez E, Nordmann TM, Mund A, Mann M: Spatial single-cell mass spectrometry defines zonation of the hepatocyte proteome, bioRxiv, 3. Dec 2022, doi: https://doi.org/10.1101/2022.12.03.518957

Leica LMD6 & LMD7 激光顯微切割系統(tǒng)
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