人肝癌細(xì)胞HepG2的培養(yǎng)攻略及應(yīng)用

圖1 HepG2 人肝癌細(xì)胞
 

首先我們討論的是HepG2長(zhǎng)得怎么才算好呢？相比于其它細(xì)胞，HepG2長(zhǎng)得相對(duì)ugly一些，這個(gè)細(xì)胞狀態(tài)好的形態(tài)學(xué)表現(xiàn)有哪些？我們來(lái)看一組對(duì)比（圖3和圖4）。

差的細(xì)胞特點(diǎn)：細(xì)胞裂解，背景臟；

好的細(xì)胞特點(diǎn)：細(xì)胞克隆成島狀，背景干凈，對(duì)比是很鮮明的。

接下來(lái)我們討論一下HepG2細(xì)胞消化問(wèn)題。在體外培養(yǎng)時(shí)，該細(xì)胞容易聚團(tuán)呈島狀（如圖4所示），且如果長(zhǎng)得過(guò)滿，輕度消化就成片下來(lái)，容易成團(tuán)。

圖4 HepG2細(xì)胞聚團(tuán)增殖成呈島狀分布
 

傳代時(shí)，怎樣才能使HepG2消化成單個(gè)細(xì)胞？

有兩種解決辦法：

※ 融合率達(dá)到80%即可傳代，長(zhǎng)太滿容易成片脫落；

※ 先用胰酶消化約3分鐘，用完培終止消化作用，然后用移液管將細(xì)胞懸液吸起，將管口稍微用力按在培養(yǎng)瓶底部，用力快速將細(xì)胞懸液擠出（可重復(fù)一次），可有效減輕細(xì)胞聚團(tuán)。
 

HepG2是最為常用肝癌細(xì)胞系之一，主要用于肝臟研究。

肝炎病毒研究：HepG2是常用的研究HBV和HCV細(xì)胞系模型，利用CRISPR/Cas9構(gòu)建基因敲除HepG2的HBV感染細(xì)胞模型細(xì)胞，為徹底治愈乙肝提供新思路。體外肝癌（HCC）模型：HepG2中p53抑癌基因無(wú)突變，因此可用于研究p53與肝細(xì)胞癌（HCC）的密切關(guān)系，以及HCC的發(fā)病、診治、預(yù)防。

藥物研究：肝臟是人體內(nèi)藥物代謝的最主要器官，也是重要的解毒器官。HepG2細(xì)胞系無(wú)論在形態(tài)上還是功能上都更接近于人的肝組織，該細(xì)胞系常用于藥物代謝和肝毒性研究。
 

本期講解就到這里了，下一期您想了解哪種細(xì)胞的培養(yǎng)攻略呢？歡迎留言評(píng)論哦。如有細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題，歡迎掃碼加入我們微信群哦。
 

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