熒光素酶檢測進(jìn)階：6重?zé)晒馑孛阜治鍪褂媒坛?/b>

我們做過熒光素酶報(bào)告基因檢測，做過雙報(bào)告基因檢測，那 6 重報(bào)告基因檢測排上日程了嗎？他來了他來了，BMG LABTECH 帶著 CLARIOstar PLUS 多功能酶標(biāo)儀來了。CLARIOstar PLUS 光譜掃描功能幫助從 12 個(gè)熒光素酶中找到 6 個(gè)適合多重?zé)晒馑孛阜治�，能夠探測 5 個(gè)細(xì)胞內(nèi)信號反應(yīng)和一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化對照。

首先，我們使用 CLARIOstar PLUS 發(fā)光光譜掃描功能對 12 種熒光素酶進(jìn)行了表征，以確定光譜分辨多重信號的能力。圖 2 顯示了 6 種 D-LUC-（左）和 6 種 CLZN 為底物熒光素酶（右）的結(jié)果。

然后，根據(jù)光譜數(shù)據(jù)以及底物特異性和淬滅能力的結(jié)果，挑選出 6 種熒光素酶進(jìn)行進(jìn)一步測試。

最后，我們進(jìn)行了驗(yàn)證測試，檢測經(jīng)驗(yàn)證的 siRNA 方法敲除多重螢光素酶測定的單一成分的直接和間接影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)除了靶基因敲除外，還可以觀察到對其他成分表達(dá)的明顯影響。

CLARIOstar PLUS 自帶的 LVF 線性漸變?yōu)V光片光柵，不僅可以進(jìn)行熒光光譜掃描，還具備獨(dú)有的化學(xué)發(fā)光光譜掃描能力，是開發(fā)這種多重?zé)晒馑孛笝z測的理想工具。使用發(fā)光光譜掃描，可以對多種熒光素酶進(jìn)行表征，以找到可以相互區(qū)分的組別。多色發(fā)射濾光片和試劑注射器的結(jié)合使用，幫助建立了一個(gè)完整的 6 重?zé)晒馑孛笝z測系統(tǒng)。6 重?zé)晒馑孛笝z測能極大地?cái)U(kuò)展了我們評估 siRNA、配體和化合物處理效果的能力，提供全面理解復(fù)雜生物系統(tǒng)所需的豐富數(shù)據(jù)。
 

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