如何利用Feyond-A400多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行TRFIA檢測

 
一、癌胚抗原的由來
癌胚抗原( Carcinoembryonic antigen,CEA)是一種分子量為150,000-300,000道爾頓的糖蛋白。1965年首先由加拿大學(xué)者從結(jié)腸腺瘤和胎兒腸中提取的一種腫瘤相關(guān)抗原。主要存在于直腸，結(jié)腸癌組織和胚胎腸粘膜上。因這種抗原也存在于2～6個月胚胎的胃腸、肝臟和胰腺組織中，故名癌胚抗原，也稱胚胎抗原（EA）或胎兒抗原（FA）[1]。
 
二、癌胚抗原的臨床意義
人體血清中的CEA屬于廣譜腫瘤標(biāo)志物，其濃度與各臟器癌特別是結(jié)腸癌密切相關(guān)，凡內(nèi)胚層來源的惡性腫瘤如結(jié)腸、直腸、食道、胃、肝和胰腺等的癌腫瘤病人血清中均有CEA存在, 并含量明顯高于非腫瘤病人[2]。腫瘤患者血清CEA水平與腫瘤的進(jìn)展相關(guān)，追蹤測定CEA有助于腫瘤術(shù)后觀察和對手術(shù)成敗的判斷。
 
三、癌胚抗原的檢測技術(shù)
用于檢測 CEA的方法已有酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）、放射免疫分析法（RIA）、化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法（ECLIA）和時間分辨熒光免疫分析法（TRFIA）。TRFIA是20世紀(jì)80年代迅速發(fā)展起來的一種公認(rèn)最有前途的非放射性免疫標(biāo)記技術(shù)[3]，TRFIA具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好、測定范圍寬和非放射性等優(yōu)點(diǎn)。

奧盛Feyond-A400多功能酶標(biāo)儀是在Feyond-A300的基礎(chǔ)上新增TRF檢測功能，可實(shí)現(xiàn)對TRFIA類實(shí)驗的檢測。
 
四、材料
癌胚抗原測定試劑盒（廣州達(dá)瑞）
Feyond-A400多功能酶標(biāo)儀
 
五、方法
. 標(biāo)品配方
配制CEA標(biāo)準(zhǔn)品，濃度分別為 1、5、10、100、560 ng/mL。

儀器參數(shù)設(shè)置

試劑波長	EX/EM：365/612
PMT增益	中高
穩(wěn)定時間	150ms
積分時間	40μs
TRF延遲	100μs

六、結(jié)果
. 分析參數(shù)

曲線擬合方式	樣條函數(shù)
X軸	LOG
Y軸	LOG-B

Feyond-A400內(nèi)置的數(shù)據(jù)處理軟件可直接將CEA標(biāo)準(zhǔn)品濃度與熒光強(qiáng)度進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合，利用三次樣條擬合方式得出曲線。
   
與通常的熒光免疫分析法相比，TRFIA可有效避免本底熒光的干擾，大大提高檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、食品檢測、和獸藥殘留檢測等領(lǐng)域。而Feyond-A400的TRF檢測功能可實(shí)現(xiàn)TRFIA相關(guān)應(yīng)用的檢測。
   
參考文獻(xiàn)
[1]史蕓,王振軍,王斌.癌胚抗原與臨床疾病的關(guān)系研究進(jìn)展[J].中國醫(yī)師雜志, 2005(S1):4.DOI:CNKI:SUN:DDYS.0.2005-S1-341.
[2]李偶連,劉翠,童艷麗,等.癌胚抗原(CEA)檢測技術(shù)的研究進(jìn)展[J].分子診斷與治療雜志, 2008, 20(002):48-51.
[3]喬艷紅,谷澤亮,張湔,等.乙肝病毒表面抗體TRFIA方法的建立及其應(yīng)用[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2007,14(1):3.DOI:10.39
69/j.issn.1006-1703.2007.01.009.
 
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