巰基嘌呤通過磷酸化PD-1有效抑制SHP2的募集

文獻(xiàn)信息

暨南大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，生命與健康工程研究院，廣東省高校功能蛋白研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，“腫瘤分子生物學(xué)”教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、廣東省高等學(xué)校功能蛋白研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、首都醫(yī)科大學(xué)北京同仁醫(yī)院等單位的研究成果“6-Mercaptopurine potently inhibits recruitment of SHP2 by phosphorylated PD-1 to inhibit PD-1 signalling and enhance T cell function（6-巰基嘌呤通過有效抑制磷酸化PD-1招募SHP2來以抑制PD-1信號傳導(dǎo)并增強(qiáng)T細(xì)胞功能）在雜志Immunology（IF：7.215）上發(fā)表。平生公司的活體CT（Super nova）在論文中提供了重要的小鼠肺部腫瘤圖像。

文獻(xiàn)摘要

阻斷PD-1/PD-L1相互作用的抗體已被批準(zhǔn)用于腫瘤治療并且產(chǎn)生了非常好的治療效果。小分子藥物在許多方面都優(yōu)于蛋白質(zhì)藥物，抑制PD-1信號傳導(dǎo)的小分子正處于不同的發(fā)展階段。目前，這些小分子抑制劑很大一部分通過與PD-L1蛋白的有限區(qū)域結(jié)合來實(shí)現(xiàn)這一目的，從而限制了化學(xué)結(jié)構(gòu)的選擇。迫切需要開發(fā)PD-1小分子抑制劑的替代策略來拓寬化學(xué)結(jié)構(gòu)的選擇。因此，作者報(bào)道了6-巰基嘌呤（6-MP）抑制PD-1信號傳導(dǎo)，在體外和體內(nèi)激活T細(xì)胞功能，并通過激活細(xì)胞毒性T細(xì)胞來產(chǎn)生抗腫瘤的效果。從機(jī)制上講，6-MP通過阻斷PD-1對SHP2的募集，有效抑制PD-1信號傳導(dǎo)。6-MP是一種已經(jīng)被美國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)用于兒童的化療藥物。

實(shí)驗(yàn)方法

所有小鼠均在暨南大學(xué)的無特定病原體環(huán)境中飼養(yǎng)。所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均按照批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。EGFR-L858R/CC10RTTA小鼠用含四環(huán)素（Dox）的飲食喂養(yǎng)2周以誘導(dǎo)肺腺癌。使用計(jì)算機(jī)斷層掃描（平生醫(yī)療科技有限公司）記錄腫瘤負(fù)荷。小鼠用6-MP（TargetMol，T0010，20mg/kg/天，i.g.）處理。為了刪除CD8+T細(xì)胞，在用6-MP治療之前，每周注射兩次CD8a的抗體（BioXcell，BE0061），持續(xù)2周。使用計(jì)算機(jī)斷層掃描（平生醫(yī)療科技有限公司）監(jiān)測腫瘤負(fù)荷。肺組織用蘇木精-伊紅染色。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

6-MP通過增強(qiáng)T細(xì)胞的功能來抑制原位瘤的生長

作者在體內(nèi)測試了6-MP的腫瘤治療效果。為此，作者之前報(bào)道了一種由L858R突變型EGFR（TetO-EGFR-L858R/CC10RTTA雙轉(zhuǎn)基因小鼠）驅(qū)動(dòng)的癌癥轉(zhuǎn)基因小鼠模型，該模型在四環(huán)素誘導(dǎo)2周后產(chǎn)生肺癌。使用計(jì)算斷層掃描（CT）對這些小鼠的腫瘤負(fù)荷進(jìn)行成像，并將其隨機(jī)用于對照、6-MP和aCD8/6-MP的治療。引人注目的是，作者發(fā)現(xiàn)與對照組的持續(xù)生長形成鮮明對比，6-MP治療后小鼠的肺部腫瘤幾乎完全消退（圖4I–n）。

6-MP通過增強(qiáng)T細(xì)胞的功能來抑制原位瘤的生長。（I）6-MP在由L858R突變體EGFR驅(qū)動(dòng)的轉(zhuǎn)基因小鼠中有效地縮小肺腫瘤。TetO-EGFR-L858R；CC10RTTA雙轉(zhuǎn)基因小鼠加入四環(huán)素糧食誘導(dǎo)2周。通過計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）記錄腫瘤負(fù)荷。心臟被標(biāo)記為H；右肺的一個(gè)代表性癌癥位點(diǎn)用紅色圓圈突出顯示。（m）I圖的腫瘤負(fù)荷的統(tǒng)計(jì)；（n）肺組織的HE染色。

文獻(xiàn)結(jié)論

作者目前的研究確定6-MP是一種有效的PD-1抑制劑。作者在體外和體內(nèi)測試了其激活T細(xì)胞功能以殺死靶腫瘤細(xì)胞的能力。6-MP是一種治療淋巴細(xì)胞白血病的化學(xué)治療劑，淋巴細(xì)胞白血病被認(rèn)為具有細(xì)胞毒性，因?yàn)樗鼤��?dǎo)致DNA損傷。因此，作者目前的研究為這種抗癌藥物的潛在功能模式提供了新的線索。

使用設(shè)備

   
Micro CT（型號：Super Nova）（平生科技）

    影像軟件：Avatar（平生科技）