OT-2移液工作站搭載熱振蕩模塊，助力三種 ELISA 流程實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化

酶免疫分析（EIA）或酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）是液體樣本中檢測(cè)目標(biāo)分子（例如抗原）的常用分析工具，通常用于免疫診斷或研究。該測(cè)定一般采用 96 孔板格式，其工作流程通常包括試劑轉(zhuǎn)移和混合，以及一些在恒定溫度下的孵育和洗滌步驟。這些步驟均要求樣本處理具備高度一致性。為了實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，有研究人員使用 OT-2 自動(dòng)化移液工作站搭配熱振蕩模塊，開(kāi)發(fā)和測(cè)試了三種 ELISA 全自動(dòng)化方案，包括 Takara Bio 的人纖維連接蛋白（FN）夾心 EIA，Tecan 的唾液皮質(zhì)醇競(jìng)爭(zhēng) ELISA，以及 Cell Sciences 的中和 SARS-CoV-2 抗體競(jìng)爭(zhēng) ELISA。
 
實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介：
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）是一種通過(guò)高度特異的抗體-抗原的相互作用對(duì)液體樣本的目標(biāo)分子（例如抗原）進(jìn)行檢測(cè)和定量的技術(shù)。這種測(cè)定通常在 96 孔或 384 孔板上進(jìn)行，其提供用于固定抗原的固體表面，一般通過(guò)將抗原直接連接到固體表面或通過(guò)使用預(yù)涂在固體表面上的捕獲抗體來(lái)實(shí)現(xiàn)。通過(guò)該過(guò)程，它能夠?qū)⒖乖�與樣本中其他非靶標(biāo)分子分離開(kāi)來(lái)。
 
ELISA 的常規(guī)操作步驟包括試劑轉(zhuǎn)移、孵育以及重復(fù)洗滌，這些步驟可以在 OT-2 上輕松實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。在每個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟之間會(huì)進(jìn)行連續(xù)的洗滌，以去除未結(jié)合的分子。為了防止剩余的試劑被帶到下一個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟中，把殘留的液體全部吸走顯得尤為重要。Opentrons 的 8 通道移液器可進(jìn)行高效、精準(zhǔn)的移液處理，以充分滿(mǎn)足 ELISA 中試劑轉(zhuǎn)移和洗滌的需求。此外，還可以通過(guò)添加 Opentrons 溫控模塊或熱振蕩模塊，以提升自動(dòng)化水平和滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)中樣本孵育環(huán)節(jié)所需的恒溫功能（例如設(shè)定 37℃ 以促進(jìn)抗原-抗體相互作用）。
 
方案亮點(diǎn)：
1、配備 8 通道移液器和熱振蕩模塊的 OT-2 移液工作站，具備高精度自動(dòng)化完成 ELISA 的能力。
2、在更高通量設(shè)置中，該方案可以在最短的動(dòng)手時(shí)間內(nèi)處理多達(dá) 96 個(gè)樣本。
 
部分方案圖片：
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通過(guò)使用 OT-2 進(jìn)行三種 ELISA 檢測(cè)，作者得出結(jié)論：
1、在 OT-2 上進(jìn)行的稀釋處理和吸光度測(cè)量顯示出高度一致的結(jié)果，證實(shí)了 OT-2 液體處理的精確性和可重復(fù)性。
2、根據(jù)廠(chǎng)家說(shuō)明書(shū)的要求，該對(duì)照組的 OD450 值都在有效范圍內(nèi)，驗(yàn)證了實(shí)驗(yàn)的有效性。
3、通過(guò)比較抑制率（確定樣本中是否存在中和抗體），成功檢測(cè)到先前被診斷為 SARS-CoV-2 抗體陽(yáng)性的樣本中存在的中和抗體。
 
綜上所述，該實(shí)驗(yàn)在檢測(cè)中和抗體方面表現(xiàn)出優(yōu)越的精確性和可靠性，OT-2 的樣品處理能力足以與傳統(tǒng)手動(dòng)操作方法相媲美。