活細胞成像在監(jiān)測細胞形態(tài)中的應用

 

• 引言

細胞是生命活動的基本結構與功能單位。細胞種類繁多，且形態(tài)各異，有球形、橢圓形、扁平形、長梭形、星形等。各種細胞總是會保留自己的固有形態(tài)，而且其形態(tài)與功能相適應。
細胞形態(tài)的變化（細胞的形狀與外觀）與細胞的狀態(tài)密切相關，細胞是否受到污染以及細胞所處的凋亡階段等均可以通過對細胞形態(tài)的觀察進行判定。
 
二、細胞形態(tài)監(jiān)測的應用

• 判定細胞污染

細胞發(fā)生不同的污染，形態(tài)會有不同的變化，如細胞發(fā)生細菌污染，會導致細胞胞內顆粒增多、增粗，最后變圓脫落死亡；若細胞發(fā)生真菌污染，則可以觀察到各種形狀的菌絲；若細胞膜周圍和細胞間隙之間出現(xiàn)很多不動的小黑點，則可能發(fā)生了支原體污染。根據形態(tài)變化來判定不同的污染情況，有助于我們采取相應的措施來挽救細胞。但是一旦發(fā)生細胞污染，必定會影響我們的實驗進程，更為嚴重的是當一個細胞發(fā)生污染可能會造成實驗室內的所有細胞都受到影響。
因此，定期檢查培養(yǎng)細胞的形態(tài)對成功的細胞培養(yǎng)實驗來說至關重要。細胞形態(tài)的監(jiān)測除了可以確認細胞健康狀態(tài)，也可以讓我們及早發(fā)現(xiàn)污染跡象，及早控制。  

• 判定細胞凋亡

細胞凋亡是程序性的細胞死亡方式，是細胞受到特定基因調控后的主動性死亡過程，具有獨特的形態(tài)學變化。細胞凋亡早期，細胞首先變圓，與鄰近細胞脫離，失去微絨毛，胞質脫水濃縮，胞膜迅速發(fā)生空泡化，細胞體積逐漸縮小，出現(xiàn)固縮，內質網擴張呈泡狀并與細胞膜融合，形成膜表面的芽狀突起；在凋亡晚期，核染色質高度濃縮融合成團狀，核染色質密度增高呈半月形或馬蹄形分布，并凝集在核膜周邊，核仁裂解，形成凋亡小體。根據細胞形態(tài)的變化可以在明場或熒光通道下明確的判定細胞是否發(fā)生凋亡以及所處的凋亡階段。  
對細胞形態(tài)學的監(jiān)測還可以應用于識別特定的細胞、藥物篩選等方面�？梢允褂霉鈱W顯微鏡、電子顯微鏡、掃描顯微鏡進行細胞形態(tài)學的監(jiān)測，此外，活細胞成像分析系統(tǒng)也可以完美的用于監(jiān)測細胞形態(tài)的變化。
 
三、Celloger^®產品介紹
Celloger^®系列儀器體積小巧，可以放置在多種細胞培養(yǎng)箱內，并且可以承受自生熱量，實現(xiàn)長期細胞成像（圖5）。Celloger^®系列優(yōu)化了熒光濾光片和光路，可以以最小的光強實時獲得清晰的活細胞明場圖像和熒光圖像，極大程度的降低細胞光毒性。Celloger^®系列產品包括Celloger Nano、Celloger Mini Plus、 Celloger Pro以及Celloger Stack，可根據自己的需求選擇需要的產品（圖6）。  

• Celloger^®產品應用

 
使用Celloger^® Mini plus （10×物鏡）對Raw264.7細胞進行活細胞成像，間隔拍攝時間為15分鐘，下圖為0h、11h、22h的代表性圖像（圖7）。  
使用Celloger^® Mini plus對Raw264.7細胞進行實時監(jiān)測，結果表明，與未經過LPS處理（200ng/mL）的細胞相比，處理組細胞粘附得更加牢固，變得更寬更平（圖7）。
 
四、結尾
使用Celloger^®系列活細胞成像系統(tǒng)將拓展您的細胞研究思路，為您提供獲得最佳質量圖像和準確研究結果所需工具。各種基于細胞的研究工作和應用都可以在這個全方位系統(tǒng)內完成。
后續(xù)我們將為您繼續(xù)介紹活細胞成像系統(tǒng)在不同研究下的應用實例，敬請關注。