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昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)介紹

瀏覽次數(shù):831 發(fā)布日期:2024-3-28  來(lái)源:卡梅德生物
         昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng),是一種廣泛用于昆蟲(chóng)桿狀病毒蛋白表達(dá)的系統(tǒng),涉及使用桿狀病毒,這是一種昆蟲(chóng)特異性病毒,在昆蟲(chóng)細(xì)胞中傳遞和表達(dá)外源基因。以下是昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的一些特征:
        
1.桿狀病毒作為載體:桿狀病毒具有有效感染昆蟲(chóng)細(xì)胞并將外源基因引入其基因組的能力。這些病毒可以被改造成攜帶和表達(dá)感興趣的基因,使其成為昆蟲(chóng)桿狀病毒蛋白表達(dá)的有用載體。
        
2.昆蟲(chóng)細(xì)胞系:昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)主要利用來(lái)源于秋粘蟲(chóng)(草地貪夜蛾)或卷心菜環(huán)蛾(Trichoplusia ni)的昆蟲(chóng)細(xì)胞系。這些細(xì)胞系,如Sf9和Sf21,由于其高轉(zhuǎn)染效率和支持強(qiáng)大病毒復(fù)制的能力,通常用于蛋白表達(dá):如昆蟲(chóng)sf9細(xì)胞表達(dá)、昆蟲(chóng)sf21細(xì)胞表達(dá)。
     
 3.蛋白質(zhì)折疊和翻譯后修飾:昆蟲(chóng)細(xì)胞擁有一種真核細(xì)胞機(jī)制,能夠進(jìn)行適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊和譯后修飾,如糖基化和磷酸化。該系統(tǒng)對(duì)于生產(chǎn)需要這些修飾以獲得適當(dāng)功能的復(fù)雜且具有生物活性的重組蛋白是特別有利的。
      
 4.高蛋白產(chǎn)量:昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)以其產(chǎn)生高產(chǎn)量重組蛋白的能力而聞名。桿狀病毒可以有效地感染昆蟲(chóng)細(xì)胞并在其中復(fù)制,從而導(dǎo)致高水平的蛋白質(zhì)表達(dá)。該系統(tǒng)對(duì)難以在其他系統(tǒng)(如細(xì)菌或哺乳動(dòng)物細(xì)胞)中表達(dá)的蛋白質(zhì)特別有益。
     
5.懸浮培養(yǎng):昆蟲(chóng)細(xì)胞可以在懸浮培養(yǎng)中生長(zhǎng),從而可以大規(guī)模生產(chǎn)重組蛋白,懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)為大量生產(chǎn)蛋白質(zhì)提供了可擴(kuò)展性和易操作性。

 6.安全性:昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)被認(rèn)為是安全的,因?yàn)闂U狀病毒是昆蟲(chóng)特有的,不會(huì)感染脊椎動(dòng)物,包括人類(lèi)。昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)在生物安全方面提供了額外的優(yōu)勢(shì),并避免了與基于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的表達(dá)系統(tǒng)相關(guān)的潛在風(fēng)險(xiǎn)。
       
7.下游加工:昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生的重組蛋白通常分泌到培養(yǎng)基中,簡(jiǎn)化了下游加工。在收獲培養(yǎng)基后,可以使用各種色譜和過(guò)濾技術(shù)來(lái)純化蛋白質(zhì)。
       
8.蛋白質(zhì)復(fù)合物和多聚體蛋白質(zhì):昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)適用于生產(chǎn)蛋白質(zhì)復(fù)合物或多聚體蛋白,允許多個(gè)亞基的共表達(dá)或融合蛋白的產(chǎn)生,促進(jìn)生物相關(guān)復(fù)合物的產(chǎn)生。
     
 9.靈活性:昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)在啟動(dòng)子選擇、載體設(shè)計(jì)和基因表達(dá)調(diào)控方面提供了靈活性,允許使用強(qiáng)啟動(dòng)子,如多面體啟動(dòng)子,來(lái)驅(qū)動(dòng)高水平的蛋白質(zhì)表達(dá)。
       
但是昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)也有其不可忽視的缺點(diǎn):過(guò)程復(fù)雜且耗時(shí);由于容納DNA量有限,會(huì)限制有效表達(dá)的基因或蛋白質(zhì)的大;盡管昆蟲(chóng)細(xì)胞為蛋白質(zhì)表達(dá)提供了真核環(huán)境,但它們所進(jìn)行的翻譯后修飾可能與哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的不同等。
     
總的來(lái)說(shuō),昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)是生產(chǎn)高產(chǎn)率和適當(dāng)折疊的重組蛋白的有力工具,其進(jìn)行翻譯后修飾的能力及其生物安全特性使其被廣泛選擇。
來(lái)源:卡梅德生物科技(天津)有限公司
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