哈格里夫斯測(cè)試實(shí)驗(yàn)精髓與操作指南：深度干貨總結(jié)

哈格里夫斯測(cè)試，首創(chuàng)于1988年，是一種精確量化小鼠與大鼠后爪在遭受輻射或紅外熱刺激后熱閾值變化的科學(xué)方法，專注于評(píng)估這些嚙齒類動(dòng)物的熱痛感知能力。該測(cè)試廣泛應(yīng)用于探究神經(jīng)損傷修復(fù)過(guò)程中的疼痛敏感度變化及熱痛反應(yīng)恢復(fù)情況的實(shí)驗(yàn)研究中。痛覺過(guò)敏，即疼痛刺激敏感性增強(qiáng)的狀態(tài)，是這些研究中的一個(gè)關(guān)鍵考量因素。多種臨床驗(yàn)證藥物，如阿片類藥物和GABA受體激動(dòng)劑，已被證實(shí)在延遲熱刺激下爪子敏感性發(fā)作方面具有顯著效果。特別是，足底注射角叉菜膠常被用來(lái)建立大鼠后爪的痛覺過(guò)敏模型，以評(píng)估如嗎啡等藥物對(duì)熱痛覺過(guò)敏的干預(yù)效果。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，有害熱刺激通過(guò)特制玻璃裝置聚焦于后爪足底，直至動(dòng)物因不適而撤回爪子。這一過(guò)程由高精度計(jì)時(shí)系統(tǒng)自動(dòng)記錄，精確至0.1秒，且設(shè)有20秒的安全截止時(shí)間，以防止組織受損。

實(shí)驗(yàn)操作流程概述如下：

環(huán)境準(zhǔn)備：選擇并準(zhǔn)備一間安靜、無(wú)干擾的房間作為行為評(píng)估區(qū)，確保外界噪音與振動(dòng)等不會(huì)引發(fā)動(dòng)物焦慮，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

動(dòng)物適應(yīng)：先將動(dòng)物從飼養(yǎng)環(huán)境轉(zhuǎn)移至測(cè)試室，置于各自的圍欄隔間內(nèi)，給予30至60分鐘的適應(yīng)時(shí)間，期間可放置蔗糖或食物顆粒輔助其放松。

重復(fù)適應(yīng)：連續(xù)兩天重復(fù)上述適應(yīng)步驟，確保動(dòng)物對(duì)測(cè)試環(huán)境充分習(xí)慣。

基線測(cè)量：在正式測(cè)試前，進(jìn)行基線讀數(shù)采集，讓動(dòng)物在圍欄內(nèi)再次適應(yīng)15至20分鐘，以便實(shí)驗(yàn)者根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)條件及動(dòng)物品種優(yōu)化測(cè)試流程。

測(cè)試準(zhǔn)備：調(diào)整紅外刺激強(qiáng)度，并將紅外發(fā)射與探測(cè)裝置精確對(duì)準(zhǔn)被測(cè)試爪子的足底中心下方，利用容器上的引導(dǎo)線確保定位準(zhǔn)確。

觀察記錄：密切觀察動(dòng)物反應(yīng)，直至其因熱刺激而自然撤回爪子。需注意區(qū)分自愿移動(dòng)與熱刺激引起的退縮反應(yīng)，后者常伴有舔爪行為。

數(shù)據(jù)記錄：一旦檢測(cè)到爪子移動(dòng)，立即記錄反應(yīng)時(shí)間。若20秒內(nèi)無(wú)反應(yīng)，則終止測(cè)試以防燙傷。

重復(fù)測(cè)試：為確保結(jié)果的可靠性，至少重復(fù)測(cè)試三次，并計(jì)算平均反應(yīng)時(shí)間。

后續(xù)處理：測(cè)試結(jié)束后，溫柔地將動(dòng)物送回飼養(yǎng)室，同時(shí)徹底清潔測(cè)試設(shè)備，為下一次使用做好準(zhǔn)備。