松脂醇二葡萄糖苷對青年大鼠骨代謝的影響

文獻信息
聯(lián)勤保障部隊第九四〇醫(yī)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實驗室、甘肅省干細胞與基因藥物重點實驗室等單位的研究成果“松脂醇二葡萄糖苷對青年大鼠骨代謝的影響”在雜志《中國藥理學(xué)通報》上發(fā)表。平生公司的離活一體CT(NEMO)在論文中提供了重要大鼠股骨圖像和定量分析。

 該研究的通訊作者為謝高倩，第一作者為牛廷獻。

文獻摘要
目的：研究松脂醇二葡萄糖苷(Pinoresinol Diglucoside)對青年大鼠骨代謝的影響。
方法：將實驗大鼠按隨機數(shù)字表達法分為Control組、PDG-25組和PDG-50組。PDG-25組和PDG-50組每天分別按25mg.kg-1和50mg.kg-1的劑量灌服PDG，Control組每天灌服等體積蒸餾水。6周后處死所有大鼠，取臟器、血清、股骨、脛骨和椎骨，用于組織病理學(xué)檢測、離體骨密度檢測、Micro CT成像分析、血清生化指標(biāo)檢測、雙熒光標(biāo)記觀察以及股骨骨組織蛋白表達分析。
結(jié)果：各組大鼠主要臟器的組織病理學(xué)結(jié)果均未見明顯異常；與Control組相比，PDG-25組和PDG-50組的離體骨密度均明顯增高；Micro CT結(jié)果顯示，PDG-50組的骨體積分數(shù)、骨小梁數(shù)以及骨小梁厚度均明顯升高，但骨小梁分離度明顯下降；PDG-25組和PDG-50組熒光標(biāo)記間距明顯增大；PDG-25組和PDG-50組組血清OPG含量明顯提高，但RANKL含量明顯降低；PDG-25組和PDG-50組BMP-2、Runx-2、OSX和OPG表達量明顯增多，RANK表達量明顯減少。

結(jié)論: 25mg.kg-1和50mg.kg-1的PDG可能通過促進骨形成和抑制骨吸收來提高青年大鼠骨質(zhì)量與骨強度。

實驗方法
動物分組與給藥
將實驗大鼠采用隨機數(shù)字表法分為3組，每組10只，分別為Control組、PDG-25組和PDG-50組。低劑量給藥組(PDG-25)灌胃25mg.kg-1PDG，高劑量給藥組(PDG-50)灌胃 50mg.kg-1 PDG，對照組(Control)灌胃等體積蒸餾水。每周周一到周六上午灌胃，周日不灌胃。持續(xù)灌胃6周后，取材并開展各項指標(biāo)檢測。

 Micro CT分析
從每組新鮮剝離的左側(cè)股骨中隨機取5根固定在4%的多聚甲醛中。Micro CT掃描條件：電壓70Kv，電流200μA。用Cruiser軟件掃描獲得原始圖像并得到縱截面最大剖面圖，選擇骨骺線下1.5-3.5mm區(qū)域通過Avatar系統(tǒng)重建，得到骨小梁立體圖以及松質(zhì)骨的骨形態(tài)參數(shù)。

實驗結(jié)果
股骨Micro CT成像分析股骨Micro CT分析得到的最大剖面圖顯示，PDG-25組和PDG-50組松質(zhì)骨骨小梁數(shù)量明顯增多(Fig 3)。重建得到的3D效果圖可以看出，PDG-25組和PDG-50組骨小梁更加密集且骨小梁間距更小(Fig4)。如Fig5 所示，PDG-50組骨體積分數(shù)(BS/TV) 和 骨 小 梁 數(shù)(Tb.N)明顯高于Control組(P＜0.01) 、骨小梁厚度（Tb.Th）明顯高于Control組(P＜0.05) ，且骨小梁分離度(Tb.Sp)極明顯低于Control組(P＜0.01)。結(jié)果提示PDG可促進青年大鼠骨形成從而增強骨微結(jié)構(gòu)。

Fig 3 Maximum profile of Micro CT imaging analysis of femur in each group

Fig 4 3D reconstruction map of Micro CT imaging analysis of femur in each group

Fig 5 Quantitative analysis of Micro CT indexes of femoral cancellous bone in each group (x̄ ± s, n = 5)  * P < 0.05,  * *P < 0.01 us control

文獻結(jié)論
綜上所述，本實驗結(jié)果初步顯示，PDG可明顯提高青年大鼠的骨密度，因而有可能通過提高峰值骨量而預(yù)防大鼠骨質(zhì)疏松，且其作用機制可能與影響骨形成和骨吸收有關(guān)。這些結(jié)果表明，PDG很可能是杜仲抗骨質(zhì)疏松的有效成分，應(yīng)具有開發(fā)為抗骨質(zhì)疏松藥物的潛力。但此種作用與其他已報道能提高峰值骨密度的天然產(chǎn)物或藥物相比有何優(yōu)勢，PDG對于由切除卵巢引起的絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松有無預(yù)防或治療作用，其作用機制如何，與其他藥物相比有何優(yōu)勢等等，該課題組接下來將對這些問題予以研究。

使用設(shè)備

                                 

Micro CT (型號：NEMO) (平生醫(yī)療科技)

影像軟件：Avatar（平生醫(yī)療科技）