AT Protein A Diamond Ultra親和層析介質(zhì)的應(yīng)用案例分享
在上周的文章《博格隆推出抗體純化新品AT Protein A Diamond Ultra》中，我們詳細(xì)介紹了博格隆最新推出的AT Protein A Diamond Ultra親和層析介質(zhì)的核心特點和研發(fā)背景。
本期，我們將通過具體的應(yīng)用案例和詳實的測試數(shù)據(jù)，進一步展示這款產(chǎn)品在實際使用中的卓越性能，幫助大家更深入地了解博格隆AT Protein A Diamond Ultra親和層析填料的強大功能。
產(chǎn)品性能
博格隆AT Protein A Diamond Ultra親和層析填料通過將重組耐堿的Protein A配基與高剛性瓊脂糖基架相結(jié)合，不僅顯著提高了動態(tài)結(jié)合載量（≥75mg 人IgG/mL介質(zhì)），還具備優(yōu)異的耐堿性能，可耐受0.1~0.5M NaOH處理。
與前一代產(chǎn)品相比，博格隆AT Protein A Diamond Ultra親和層析填料在載量、流速和耐用性等方面均有顯著提升，能夠滿足從實驗室到工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)的各種需求。
+顆粒大小呈正態(tài)分布，D50值對應(yīng)的粒度代表小于此粒度的顆粒體積之和與大于此粒度的顆粒體積之和相同。
++動態(tài)結(jié)合載量為3mg/mL的靜脈注射用人IgG在PBS緩沖液中，接觸時間為6min時的10%動態(tài)結(jié)合載量。
應(yīng)用案例
• 樣品信息：雙抗，分子量148KDa
• 層析柱規(guī)格：EzScreen 4.3mL，柱高10cm
• 流速：0.7mL/min
• 平衡緩沖液：PB體系，pH7.2
• 洗脫緩沖液：NaAc-HAc 體系，pH3.3
動態(tài)結(jié)合載量測試數(shù)據(jù)
在本案例中，我們使用某雙特異性抗體樣品分別對12款市售填料進行載量測試， 記錄其在10%流穿時的動態(tài)載量數(shù)據(jù)（見Fig. 2）。
測試數(shù)據(jù)顯示，博格隆AT Protein A Diamond Ultra親和層析填料的動態(tài)結(jié)合載量為43.88mg/mL介質(zhì)，高于市場上的其他同類產(chǎn)品。在相同操作條件下，這一高載量使得該產(chǎn)品能夠處理更多的樣品，提升整體生產(chǎn)效率。
純化過程及結(jié)果
通過對比純化前后的樣品純度，我們發(fā)現(xiàn)博格隆AT Protein A Diamond Ultra親和層析填料能夠有效去除雜質(zhì)，提高目標(biāo)抗體的純度。Fig. 3與Fig. 4展示了純化過程中的圖譜及純化檢測結(jié)果。
Fig. 4 純化結(jié)果記錄表案例二：高效純化單克隆抗體
• 樣品信息：某單抗分子，分子量148KDa
• 層析柱規(guī)格：EzScreen 4.3mL，柱高10cm
• 流速：0.7mL/min
• 平衡緩沖液：Tris-HCl體系，pH7.2
• 清洗緩沖液：檸檬酸體系，pH5.5
• 洗脫緩沖液：Gly-HCl體系，pH3.6
動態(tài)結(jié)合載量測試數(shù)據(jù)
在本案例中，我們用某單克隆抗體樣品分別對博格隆三款抗體親和填料進行載量測試，記錄其在10%流穿時的動態(tài)載量數(shù)據(jù)（見Fig. 5）。
測試數(shù)據(jù)顯示，博格隆Extrem A Diamond動態(tài)結(jié)合載量最高，為71.63mg/mL，博格隆AT Protein A Diamond Ultra親和層析填料的動態(tài)結(jié)合載量與博格隆Extrem A Diamond接近，為69.44mg/mL。
純化過程及結(jié)果
通過對比純化前后的樣品純度，我們發(fā)現(xiàn)博格隆AT Protein A Diamond Ultra親和層析填料能夠有效去除雜質(zhì)，提高目標(biāo)抗體的純度。Fig. 6與Fig. 7展示了純化過程中的圖譜及純化檢測結(jié)果。
通過具體的應(yīng)用案例和詳盡的測試數(shù)據(jù)，我們深入解析了博格隆AT Protein A Diamond Ultra親和層析填料在實際應(yīng)用中的卓越性能。這款產(chǎn)品不僅在實驗室規(guī)模的純化中表現(xiàn)出色，在工業(yè)化放大生產(chǎn)中也展現(xiàn)出了強大的穩(wěn)定性和高效性。
