顯微成像案例：THUNDER技術(shù)圖庫(kù)（二）

為了幫助您回答重要的科學(xué)問(wèn)題，THUNDER技術(shù)消除了使用基于相機(jī)的熒光顯微鏡觀察厚樣品時(shí)產(chǎn)生的焦外模糊現(xiàn)象。THUNDER技術(shù)采用了我們?nèi)�新的光電�?shù)字技術(shù)--Computational Clearing。因此，可以對(duì)多種三維樣品（包括模式生物、組織切片和三維細(xì)胞培養(yǎng)物）進(jìn)行高速、高質(zhì)量成像。請(qǐng)看這些圖片，了解THUNDER技術(shù)是如何幫助研究人員揭示樣品深處最精細(xì)的結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)的。

當(dāng)您看到THUNDER技術(shù)實(shí)現(xiàn)的無(wú)霧圖像質(zhì)量后，請(qǐng)?jiān)L問(wèn)我們的產(chǎn)品頁(yè)面了解更多信息。了解THUNDER技術(shù)如何將Computational Clearing與寬場(chǎng)顯微鏡的速度、熒光信號(hào)靈敏度和易用性相結(jié)合，從而實(shí)時(shí)解碼三維生物學(xué)*。（*符合 ISO/IEC 2382:2015 標(biāo)準(zhǔn)）

類器官集群，細(xì)胞核用 DAPI 染色，細(xì)胞質(zhì)膜用 GFP 染色。圖片由奧地利維也納醫(yī)科大學(xué)癌癥研究所 Dana Krauß 提供。

顱神經(jīng)的發(fā)育 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

這些圖像是使用 20 倍的多色散物鏡采集的，物鏡的數(shù)值孔徑為 0.75，工作距離接近 700 微米。圖像由 32 塊拼接而成，成像深度為 672 微米（337 步）。圖片由美國(guó)華盛頓特區(qū)喬治華盛頓大學(xué) Anastas Popratiloff 提供

胰島 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

對(duì)離體人類胰島進(jìn)行 EDoF 重建，以實(shí)驗(yàn)檢測(cè)單個(gè)人類胰島細(xì)胞中促炎細(xì)胞因子 IL-17 的表達(dá)。圖像具有以下標(biāo)記：胰島素（AF488；綠色）、胰高血糖素（AF555；紅色）和 IL-17（AF647；品紅色）以及 Hoechst（細(xì)胞核；藍(lán)色）。圖片由美國(guó)加利福尼亞州拉霍亞免疫學(xué)研究所 Matthias Von Herrath 實(shí)驗(yàn)室提供

小鼠大腦 - THUNDER技術(shù)

紅色 - AMPK，綠色 - Iba1。圖片由美國(guó)德克薩斯農(nóng)工大學(xué)的 Maheedhar Kodali 和 Ashok K. Shetty 提供

花粉花 - THUNDER技術(shù)

用 20x/0.8 物鏡拍攝，面積為 6mm²，深度為 100μm。15 幅 4 種顏色（DAPI/GFP/TRITC/Cy5）的拼接圖像，共計(jì) 13020 幅圖像。視頻由美國(guó)徠卡顯微系統(tǒng)公司 James Marr 提供

C.elegans Gonades - THUNDER技術(shù)

成年雌雄同體，染色：藍(lán)色 - DAPI（細(xì)胞核），綠色 - SP56（精子），紅色 - RME-2（卵母細(xì)胞），紅斑 - PGL-1（RNA + 蛋白顆粒）。圖片由德國(guó)哈勒馬丁路德大學(xué) Christian Eckmann 博士教授提供

小鼠主動(dòng)脈 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

RAW 延時(shí)攝影 - 在涂有明膠的 1.5 號(hào)蓋玻片上對(duì)培養(yǎng)一周的腹主動(dòng)脈外植體成像 48 小時(shí)。小鼠的基因被編碼為平滑肌細(xì)胞特異性tttomato。轉(zhuǎn)錄事件發(fā)生后，平滑肌細(xì)胞切除tttomato，并開(kāi)始表達(dá) eGFP。圖片由美國(guó)夏洛茨維爾弗吉尼亞大學(xué) Laura S. Shankman 博士提供。

小鼠主動(dòng)脈 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

THUNDER延時(shí)攝影 - 在涂有明膠的 1.5 號(hào)蓋玻片室載玻片上對(duì)培養(yǎng)一周的腹主動(dòng)脈外植體成像 48 小時(shí)。小鼠的基因被編碼為平滑肌細(xì)胞特異性tttomato。轉(zhuǎn)錄事件發(fā)生后，平滑肌細(xì)胞切除tttomato，并開(kāi)始表達(dá) eGFP。圖片由美國(guó)夏洛茨維爾弗吉尼亞大學(xué) Laura S. Shankman 博士提供。

小鼠肌纖維上的肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白染色-THUNDER技術(shù)

受感染的 MDCK 上皮細(xì)胞 - THUNDER技術(shù)

感染鼠傷寒沙門(mén)氏菌的 MDCK 上皮細(xì)胞顯示細(xì)菌誘導(dǎo)的廣泛肌動(dòng)蛋白重排（紅色）（綠色，纖毛中的 GFAP 蛋白）。物鏡：HC PL APO 40x/0.95 DRY。圖片由英國(guó)布里斯托爾大學(xué) Mark Jepson 博士提供。
 

受狂犬病感染的雪貂腦-THUNDER Imager 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀

受狂犬病感染的神經(jīng)元 - 紅色，細(xì)胞核 - 藍(lán)色。采用 DISCO 方法進(jìn)行化學(xué)清除。物鏡：HC PL FLUOTAR L 20x/0.40 DRY，410 µm z-stack。圖片由德國(guó)里姆斯 Friedrich-Loeffler 研究所 Stefan Finke 博士提供。
 

肺上皮細(xì)胞（豬）中的流感-THUNDER Imager 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀

流感病毒 - 紅色，纖毛 - 綠色，細(xì)胞核 - 藍(lán)色。物鏡：HC PL APO 40x/0.95 DRY，35 µm z-stack，最大投影。圖片由德國(guó)里姆斯 Friedrich-Loeffler 研究所 Stefan Finke 博士提供

肺器質(zhì)體 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

從肺泡干細(xì)胞和祖細(xì)胞中提取的小鼠肺器官組織。20x 空氣透過(guò) 1 毫米塑料底。樣本由德國(guó)巴特諾海姆心肺研究 MPI 的 Pumaree Kanrai 博士提供。
 

假小細(xì)胞（胰島β細(xì)胞）-THUNDER Imager 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀

生長(zhǎng)為假小體（胰島β細(xì)胞）的 MIN6 細(xì)胞。DAPI（藍(lán)色）、胰島素（Alexa488，綠色）、膜受體（Alexa594，紅色）、類磷脂質(zhì)蛋白（Alexa647，白色）。樣本由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 Rémy Bonnavion 博士提供。

蝗蟲(chóng)神經(jīng)節(jié) - THUNDER技術(shù)-3D組織成像

顯示最大投影的蝗蟲(chóng)神經(jīng)節(jié)圖像。樣本厚度為 110 微米，數(shù)據(jù)量為 376 MB，使用計(jì)算清除功能的采集時(shí)間為 3 秒。圖片由德國(guó)徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Korinna Schoch 拍攝。
 

HeLa 細(xì)胞球-THUNDER Imager 3D活細(xì)胞和3D細(xì)胞培養(yǎng)儀

用 Alexa Fluor 568 磷脂酰蛋白（肌動(dòng)蛋白）和 YOYO 1 碘化物（細(xì)胞核）染色的 HeLa 細(xì)胞球。

圖片由德國(guó)徠卡顯微系統(tǒng)公司 Jan Schumacher 博士拍攝。


斑馬魚(yú)-THUNDER技術(shù)-3D活細(xì)胞和3D細(xì)胞培養(yǎng)

斑馬魚(yú)幼體（受精后 72 小時(shí)）。血管用綠色（熒光）表示。樣本由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所的 Almary Guerra 博士和 Didier Stainier 博士提供。
 

小鼠腎臟切片 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像

小鼠腎臟切片，含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。樣品為美國(guó)馬薩諸塞州沃爾瑟姆市賽默飛世爾科技公司生產(chǎn)的 FluoCells™ 制備的 3 號(hào)載玻片。
 

皮層神經(jīng)元培養(yǎng)-THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

培養(yǎng)的皮層神經(jīng)元，其中綠色表示 beta-III-tubulin，藍(lán)色表示細(xì)胞核。由 59 個(gè)平面組成的圖像堆棧體積為 21 µm³。樣本由德國(guó)馬格德堡 FAN GmbH 提供。

 

培養(yǎng) VERO 細(xì)胞-THUNDER技術(shù) 3D細(xì)胞培養(yǎng)儀

用 STAR488 波形蛋白（綠色）、STAR580 Tom20（黃色）和 DAPI（藍(lán)色）染色的培養(yǎng) VERO 細(xì)胞。樣本由德國(guó)哥廷根 Abberior GmbH 提供。

YFP 小鼠腦切片 - THUNDER技術(shù)-組織成像

用 GFAP-A647 染色的 YFP 小鼠腦切片。用THUNDER技術(shù)組織成像。美國(guó)費(fèi)城賓夕法尼亞大學(xué) Hong Xu 博士提供。

果蠅三齡幼蟲(chóng) - THUNDER技術(shù)-組織成像

用 AlexaFluor™647 標(biāo)記突觸后位點(diǎn)、AlexaFluor™555 與類磷脂結(jié)合、AlexaFluor™488 標(biāo)記運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元亞群的果蠅三齡幼蟲(chóng)小片。樣本由美國(guó)馬里蘭州貝塞斯達(dá) NIH/NIMH 的 Amicia Elliott 博士提供。

Cyclops - THUNDER技術(shù)-組織成像

Cyclops sp. 顯示細(xì)胞核（綠色）、乙�；�-微管蛋白（紅色）和血清素（青色）。圖像堆棧的總體積為 332 微米 x 332 微米 x 84 微米，有三種顏色，每種顏色有 305 個(gè) Z 平面。使用的物鏡為 HC PL FLUOTAR 40x/1.30 OIL。樣品由羅斯托大學(xué)生物學(xué)博士 Thomas Frase 提供。Thomas Frase 提供。

斑馬魚(yú)--THUNDER技術(shù)-模式生物成像

斑馬魚(yú)幼體視頻（1x Plan APO 物鏡，變焦系數(shù) 11:1，18 z 切片堆疊，約 300 µm z 深度），其中綠色（kdrl:GFP）顯示血管生成，紅色（GATA1:dsRed）顯示紅細(xì)胞和血小板。由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所的 Almary Guerra 博士和 Didier Stainier 教授博士提供。

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