淺析溶血對(duì)生物樣本分析的影響

 溶血指的是紅細(xì)胞破裂，血紅蛋白逸出釋放到血漿或血清中，可發(fā)生在體內(nèi)和體外，影響溶血的因素也十分復(fù)雜。血漿血清發(fā)生溶血后，許多生理成分如血紅蛋白、膽紅素、磷脂等明顯增加，這些成分可能會(huì)影響溶血樣品中藥物的檢測(cè)。生物藥物分析的樣品一般為血漿或血清樣品，存在被測(cè)樣品少，樣品復(fù)雜及干擾物質(zhì)多等問(wèn)題，而且在實(shí)際的生物樣品分析工作中，采集的血漿或血清樣品常出現(xiàn)溶血的現(xiàn)象。
在進(jìn)行生物藥物分析時(shí)，溶血的發(fā)生會(huì)影響待測(cè)物的色譜分離,溶血基質(zhì)中可能會(huì)有一些特有的、與待測(cè)物質(zhì)的共流出的內(nèi)源性干擾;也可能影響待測(cè)物在質(zhì)譜檢測(cè)中的基質(zhì)效應(yīng),甚至紅細(xì)胞中釋放出的酶可能影響待測(cè)物的穩(wěn)定性。溶血導(dǎo)致的樣品測(cè)定數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確，將直接影響藥物的藥動(dòng)學(xué)研究，生物樣本分析常包含在一些藥代動(dòng)力學(xué)外包機(jī)構(gòu)提供的服務(wù)中。
LC-MS/MS技術(shù)的應(yīng)用，可獲得豐富、有效的化合物結(jié)構(gòu)信息，建立快速、高效的分析研究體系，目前已成為體內(nèi)生物藥物分析的重要方法。血漿樣本中原型藥物及代謝物的LC-MS測(cè)定法及其制劑的藥動(dòng)學(xué)和人體生物等效性研究在藥物研發(fā)中至關(guān)重要。藥動(dòng)學(xué)在不同方面的應(yīng)用有利于為臨床的安全用藥提供相關(guān)依據(jù)，也能讓研究者更好的了解藥物特性。美迪西提供藥代動(dòng)力學(xué)外包服務(wù)，藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)通過(guò)CFDA的GLP認(rèn)證，實(shí)驗(yàn)研究遵循ICH、CFDA和FDA的指導(dǎo)原則，可以根據(jù)客戶需求設(shè)計(jì)并開展體內(nèi)、體外藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)，為客戶提供一整套藥動(dòng)學(xué)評(píng)價(jià)和優(yōu)化服務(wù)。
在對(duì)生物樣本進(jìn)行分析時(shí)，要避免血清或者血漿樣品出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，溶血的發(fā)生一般有以下原因：
（1）溶血的發(fā)生可能是由于疾病狀態(tài)、生理狀況等體內(nèi)因素導(dǎo)致的。
（2）溶血的發(fā)生和樣本收集過(guò)程有直接的關(guān)系，如采血針口徑過(guò)小、抽血速度過(guò)快、采血點(diǎn)選擇不當(dāng)、止血帶使用過(guò)久、采血管未充滿、采血后過(guò)度混搖、運(yùn)輸過(guò)程中過(guò)度震蕩等，都會(huì)造成溶血。
（3）在轉(zhuǎn)運(yùn)、儲(chǔ)存過(guò)程操作不當(dāng)，如傳輸過(guò)程中劇烈震蕩;轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間長(zhǎng);轉(zhuǎn)運(yùn)車溫度過(guò)高、劇烈震蕩等也會(huì)造成溶血。
其中，體外因素是造成溶血的主要原因。血漿或血清樣品一般是在不同時(shí)間點(diǎn)采集的，涉及周期長(zhǎng)，影響因素多，溶血樣品的產(chǎn)生很難避免，因此研究人員需提前做好人員培訓(xùn)，密切關(guān)注血樣采集的全過(guò)程，減少采集、離心、凍存及轉(zhuǎn)移任何一個(gè)環(huán)節(jié)可能發(fā)生的溶血。
據(jù)網(wǎng)上報(bào)道，溶血發(fā)生后會(huì)對(duì)生物樣品分析造成以下后果：
（1）影響藥物的穩(wěn)定性，紅細(xì)胞破裂釋放的酶可能造成藥物在溶血血漿中不穩(wěn)定，研究表明激素、維生素、嗎啡等在溶血血漿中穩(wěn)定性受到影響。
（2）影響與紅細(xì)胞有高親和力的藥物，使測(cè)定濃度比實(shí)際濃度偏高，藥物濃度可高數(shù)百倍，如輕微的溶血現(xiàn)象可使甲醋唑胺的濃度顯著提高。
（3）影響血漿結(jié)合率高的藥物，細(xì)胞內(nèi)液造成藥物稀釋，測(cè)定濃度比實(shí)際濃度偏低。
（4）溶血使細(xì)胞生理成分增加，造成離子抑制或增強(qiáng)，基質(zhì)效應(yīng)顯著，影響目標(biāo)分析物的測(cè)定。
總之，對(duì)于生化檢測(cè)來(lái)說(shuō)，溶血現(xiàn)象的發(fā)生會(huì)引起檢測(cè)的誤差，造成檢驗(yàn)質(zhì)量下降等問(wèn)題，為了提高生物藥物分析的準(zhǔn)確性，需要對(duì)溶血現(xiàn)象的原因進(jìn)行深入的分析，并找出解決問(wèn)題的辦法。