傷口愈合遷移實驗怎樣劃出標準筆直的方法和應(yīng)用
傷口愈合和遷移試驗的應(yīng)用
細胞遷移發(fā)生在許多重要的生理過程中。例如，受控的細胞遷移允許胚胎發(fā)育、組織損傷和傷口愈合。相反，細胞遷移在許多病理情況下失調(diào)，例如癌癥轉(zhuǎn)移和炎癥。毫不奇怪，細胞遷移背后的原理已在許多情況下得到研究。
傷口愈合測定和遷移測定是廣泛用于分析不同條件下細胞遷移的方法。他們深入了解以下相關(guān)科學主題：
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條件遷移和傷口愈合研究：細胞如何在不同條件下遷移（例如，用特定化合物/增強劑/抑制劑處理后，使用 siRNA 或 CRISPR/Cas9 進行基因沉默后，改變底物剛度后，或改變基質(zhì)組成后)?
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高通量藥物篩選：哪種藥物會改變特定細胞類型（例如癌細胞）的遷移率？
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細胞相互作用研究：細胞是保持接觸還是單獨遷移？細胞在遷移過程中如何相互作用？什么是細胞自主遷移能力？
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2D Invasion Assays：兩種不同的細胞類型如何相互作用（例如，腫瘤細胞和成纖維細胞）？
抑制劑或促進劑對傷口愈合影響的實例分析。
與一般傷口愈合和遷移測定相比，定向遷移測定（例如趨化性測定）測量 2D 或 3D 環(huán)境中的梯度依賴性細胞運動。
如何進行傷口愈合試驗/遷移試驗
傷口愈合測定/遷移測定的最具特征的讀數(shù)是細胞覆蓋區(qū)域（間隙閉合）隨時間的變化。進行傷口愈合和遷移試驗是一個簡單的過程：
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在細胞單層內(nèi)創(chuàng)建一個物理間隙。
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通過活細胞成像或在不同時間點拍照來監(jiān)測細胞遷移到間隙的過程。
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手動或使用自動化軟件分析間隙閉合率，這是典型的實驗讀數(shù)。
ibidi Culture-Insert 2 孔| 3 孔| 4孔是硅膠插件，具有明確的無細胞間隙，用于傷口愈合、遷移、2D 侵襲檢測和細胞共培養(yǎng)。
盡管傷口愈合試驗明顯簡單，但許多因素會影響實驗結(jié)果，因此必須加以控制。在以下部分中，您將了解傷口愈合檢測的原理和設(shè)置。此外，我們將討論 需要標準化的參數(shù)，以實現(xiàn)可重現(xiàn)的、穩(wěn)健的結(jié)果。
使用 ibidi Stage Top 孵育系統(tǒng)的活細胞成像顯示了 MCF7 細胞在傷口愈合和遷移試驗中的間隙閉合。相襯; 10 倍物鏡。
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W.J. Ashby, A. Zijlstra. Established and novel methods of interrogating two-dimensional cell migration. Integr Biol 2012, 10.1039/c2ib20154b
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