Spark®酶標(biāo)儀增強(qiáng)型模塊應(yīng)用于 AlphaScreen®分析

 

AlphaScreen 是一種基于微珠的篩選技術(shù)，旨在快速、可靠且經(jīng)濟(jì)高效地檢測(cè)生物分子相互作用，近年來更是廣泛的應(yīng)用于藥物研發(fā)領(lǐng)域中。同時(shí) AlphaScreen 與 ECL、FMAT技術(shù)相似，也需要高能激光器，同其他技術(shù)相比，AlphaScreen 對(duì)于檢測(cè)儀器平臺(tái)要求更高。

不一樣的Spark酶標(biāo)儀增強(qiáng)型檢測(cè)模塊
 

高功率激光光源，濾光片優(yōu)化組合

Tecan Spark酶標(biāo)儀配備了增強(qiáng)型檢測(cè)模塊，包括用于優(yōu)化 AlphaScreen 供體微珠激發(fā)的高功率激光光源，以及優(yōu)化濾光片組合，非常適用于AlphaScreen，AlphaLISA®， AlphaPlex™ 和潛在的新 Alpha 技術(shù)應(yīng)用的發(fā)射信號(hào)超高靈敏檢測(cè)。使Spark 酶標(biāo)儀的增強(qiáng)型檢測(cè)模塊在 96 孔和 384 孔板格式的靈敏度和均一性等基本質(zhì)量參數(shù)方面，均為 AlphaScreen 檢測(cè)提供了出色的性能保證。
 

實(shí)時(shí)溫度校正功能

Spark酶標(biāo)儀還擁有 Tecan 久負(fù)盛譽(yù)的實(shí)時(shí)溫度校正功能，可改進(jìn)微孔板上樣品溫度波動(dòng)帶來的影響。可用于進(jìn)一步提高分析性能，而無需在檢測(cè)前對(duì)樣品進(jìn)行耗時(shí)的溫度平衡過程。
 

易于操作的軟件，優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)流程

Spark酶標(biāo)儀還為 Alpha 技術(shù)集成了易于使用、直觀的軟件解決方案和預(yù)先優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)流程，為AlphaScreen, AlphaLISA 和 AlphaPlex 檢測(cè)保駕護(hù)航，為科學(xué)研究、分析方法的開發(fā)以及高通量篩選等提供了卓越的性能。

 

眼見為實(shí)：AlphaScreen 技術(shù)在 Spark多功能酶標(biāo)儀上的成功應(yīng)用
 

 

結(jié)果
 

靈敏度和線性度 

Spark酶標(biāo)儀能夠檢測(cè)低至 1.6 ng/ml 的 Omnibeads 濃度，線性度為 0.9999（R2 值），信號(hào)/空白比為 1,154:1（圖 2）。
 

 

均一性

將 10,000 ng/ml Omnibeads 稀釋液的 50 多份重復(fù)的樣品移液至 384 孔板中。檢測(cè)結(jié)果表明信號(hào)均一性非常好， CV 值僅為 2.2% 。這表明 Spark 酶標(biāo)儀能夠檢測(cè) AlphaScreen 信號(hào)，且不會(huì)產(chǎn)生顯著的結(jié)果波動(dòng)（圖 3）。
 

 

讀取時(shí)間

AlphaScreen 在不同微孔板格式中的總讀取時(shí)間包括激發(fā)和積分時(shí)間，以及應(yīng)用溫度校正功能所需的時(shí)間。通常，我們推薦使用 Alpha檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置，即激發(fā)和積分時(shí)間分別為 100 和 300 毫秒，可以在 4 分 28 秒內(nèi)完成整塊 384 孔板的讀取。當(dāng)溫度校正功能激活后，基于IR 的溫度評(píng)估與信號(hào)檢測(cè)會(huì)同時(shí)進(jìn)行，因此檢測(cè)時(shí)間會(huì)稍微延長(zhǎng)。這導(dǎo)致絕大多數(shù)特定微孔板格式的讀取時(shí)間延長(zhǎng)約20%。然而， 我們可以通過使用更短的激發(fā)和發(fā)射周期（激發(fā)和積分時(shí)間都低至 10 毫秒）來顯著縮短總讀取時(shí)間，同時(shí)為個(gè)性化應(yīng)用提供優(yōu)化方案。
表2 顯示了 96 孔板和 384 孔板的 AlphaScreen 讀取時(shí)間概覽。

 

參考文獻(xiàn)

1) Using the AlphaScreen Omnibeads. www.perkinelmer.com/CMSResources/Images/ 44-73451MAN_AlphaScreenOmniBeads.pdf
 

 

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