真菌毒素檢測(cè)技術(shù)新革命---一步法凈化多毒素樣品

 

近年來，真菌毒素對(duì)糧食飼料的污染是一個(gè)全球性的熱點(diǎn)問題，不僅以黃曲霉毒素（Aflatoxin），赭曲霉毒素A（Ochratoxin A），單端孢菌毒素（Trichothecenes），玉米赤霉烯酮（Zearalenone），煙曲霉毒素（Fumonisin）和串珠鐮刀菌素（Moniliformin）發(fā)生較多，而且真菌毒素種類繁多、結(jié)構(gòu)復(fù)雜多樣，這就造成實(shí)際生產(chǎn)中，真菌毒素的定量檢測(cè)成為困擾我們的重要難題之一，目前的檢測(cè)方法包括薄層色譜法、酶聯(lián)免疫法、免疫親和柱凈化高效液相色譜法。但薄層色譜法操作繁瑣、污染大、定量差、耗時(shí)長；而酶聯(lián)免疫法雖操作簡單、靈敏度高，但特異性差，假陽性高；免疫親和柱高效液相色譜法成本太高, 對(duì)于高黃曲霉毒素含量的樣品偏差較大。迫切需要一種樣品處理簡便易行、快速準(zhǔn)確、靈敏度高、檢測(cè)限低，檢測(cè)成本低廉的檢測(cè)方法和技術(shù)。

針對(duì)這些檢測(cè)難點(diǎn)和問題，長期致力于真菌毒素檢測(cè)技術(shù)研究的Pribolab經(jīng)過不懈努力和多次試驗(yàn)驗(yàn)證，成功研發(fā)出了PriboFast^®系列各類真菌毒素多功能凈化柱和專用凈化柱，將極性、非極性及離子交換等多類基團(tuán)作為填充劑填充到柱體中，可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質(zhì),從而對(duì)毒素樣品起到非常針對(duì)性的純化作用; 系列凈化柱就是采取這種獨(dú)特設(shè)計(jì)原理過柱后將干擾物雜質(zhì)等截留在柱內(nèi)填充物,樣液中的毒素不被吸附而直接通過。其顯著特點(diǎn)是，一步就可完成毒素樣品的凈化（操作步驟見下圖）， 30秒左右即完成整個(gè)凈化過程，凈化效果理想, 實(shí)驗(yàn)證明，對(duì)谷物樣品PriboFast^®系列凈化柱比免疫親和柱回收率還要高，其對(duì)所有真菌毒素的回收率均在85－95％； 之二是操作步驟更為簡便，凈化前也不需進(jìn)行活化、淋洗和洗脫等操作只需直接上樣，有效減少有機(jī)溶劑的使用和浪費(fèi);其操作明顯不同于免疫親和柱和固相萃取柱（SPE），后兩者凈化樣品至少需要三步 1）將樣品中的待測(cè)物吸附到柱上；2）清洗柱上的雜質(zhì)；3）用有機(jī)溶劑洗脫柱子上的待測(cè)物。

 

其中    MFC160多功能凈化柱實(shí)現(xiàn)了一步凈化含多類毒素（黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和單端孢霉烯族毒素（包括嘔吐毒素）三類）樣品的目的，過柱凈化后的樣品液可直接用于液相進(jìn)行黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和單端孢霉烯族毒素（包括嘔吐毒素）三大類毒素含量的檢測(cè)，回收率達(dá)到90％以上,有效降低單個(gè)檢測(cè)成本.

總之，PriboFast^®系列真菌毒素凈化柱整個(gè)凈化過程樣品處理簡單，操作簡便易行、快速準(zhǔn)確、靈敏度高、檢測(cè)限低，檢測(cè)成本低廉,適合大批量檢測(cè)，并能避免氯仿等有毒試劑的使用,在國際上不少試驗(yàn)室已得到確認(rèn)，也是得到AOAC的官方認(rèn)可的檢驗(yàn)方法。目前在國內(nèi)的糧油質(zhì)檢系統(tǒng)、疾控系統(tǒng)和進(jìn)出口檢驗(yàn)已廣泛采用這種新的檢測(cè)方法，而且實(shí)踐證明，這是一種值得推廣和應(yīng)用的真菌毒素檢測(cè)新技術(shù)。

注: