固相萃取--樣品預(yù)處理的關(guān)鍵核心技術(shù)

固相萃取柱用于HPLC，GC，LC-MS/MS，GC-MS或其他技術(shù)分析樣品的制備。廣泛應(yīng)用在藥物代謝及動(dòng)力學(xué)、藥物分析、生物檢測(cè)、毒品和興奮劑檢測(cè)、食品安全分析、環(huán)境分析等領(lǐng)域。
    固相萃取柱應(yīng)用的科學(xué)原理很簡(jiǎn)單：一是讓待檢測(cè)的化合物通過(guò)固相萃取柱，而讓雜質(zhì)保留在固相萃取柱上，應(yīng)用廣泛的實(shí)例包括C18，PSA，NH2固相萃取柱于農(nóng)殘分析；另一種策略就是讓雜質(zhì)穿過(guò)固相萃取柱，固相萃取柱有選擇性地濃縮和保留待檢測(cè)的化合物。固相萃取就是一種“開(kāi)、關(guān)”原理，待檢測(cè)化合物要么完全保留再洗脫，要么完全不保留。部分保留或者部分洗脫意謂著一個(gè)失敗的固相萃取應(yīng)用。
　　一個(gè)成功的固相萃取產(chǎn)品或方法應(yīng)該：
1、 讓待檢測(cè)化合物的回收率達(dá)到近100%，美國(guó)FDA農(nóng)殘分析條例規(guī)定回收率為70-110%，是基于許多實(shí)際應(yīng)用中不能達(dá)到100%理想狀況的一種妥協(xié)。然而實(shí)際上如果正確的的固相萃取產(chǎn)品和應(yīng)用方法，100%的回收率很容易達(dá)到。
2、 有很高的選擇性。固相萃取作為樣品的預(yù)處理的核心技術(shù)，必須要讓處理后的分析樣品有盡可能干凈的背景。常規(guī)HPLC方法的開(kāi)發(fā)幾乎總是從C18作為出發(fā)點(diǎn)，反相色譜占了80%以上的應(yīng)用。但固相萃取的實(shí)用戰(zhàn)略和HPLC有很大不同。HPLC用于比較干凈的樣品的分析，而固相萃取用于真實(shí)世界復(fù)雜樣品的前處理。使用反相固相萃取柱吸附雜質(zhì)而達(dá)到部分清潔無(wú)可厚非，而在目前文獻(xiàn)和官方方法中成千上萬(wàn)的使用C18、HLB等硅膠或聚合物反相固相萃取柱吸附待測(cè)化合物并回收, 這明顯偏離了固相萃取的精髓，達(dá)不到最佳效果。這不僅是因?yàn)镃18、HLB等反相固相萃取柱沒(méi)有通用的方法，而且反相技術(shù)選擇性差，得到的樣品背景較臟，有許多情況下甚至不及液-液萃取，等于將固相萃取“降級(jí)”。
　　有很高選擇性的固相萃取產(chǎn)品實(shí)際上是硅膠機(jī)制的離子交換或C8+SCX混合床等產(chǎn)品。
3、 有廣泛的應(yīng)用范圍�，F(xiàn)實(shí)生活中的許多應(yīng)用，都是在“全盲”條件下進(jìn)行。譬如食品安全分析中對(duì)某一具體食品、農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)殘分析，運(yùn)動(dòng)會(huì)對(duì)興奮劑的檢測(cè)，刑偵分析中對(duì)毒物的檢測(cè)等。高品質(zhì)的固相萃取柱不僅要提供最佳的背景清除效果，而且要讓所有待檢測(cè)的成分無(wú)一遺漏。
4、 適合于定量分析的需要。實(shí)際樣品中待測(cè)化合物含量通常很低，越來(lái)越多的依賴(lài)GC-MS（氣相色譜-質(zhì)譜）特別是LC-MS/MS（液相色譜-雙質(zhì)譜）做定量分析。目前的所有固相萃取產(chǎn)品不能消除GC-MS中的介質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)和LC-MS/MS中的信號(hào)增強(qiáng)或抑制效應(yīng)，因此用基質(zhì)匹配的已經(jīng)驗(yàn)證的分析方法只適用于一種產(chǎn)地一種具體的基質(zhì)。方法驗(yàn)證的過(guò)程通常也是漫長(zhǎng)的。我們技術(shù)上的突破已經(jīng)徹底消除了70%以上化合物檢測(cè)中的基質(zhì)效應(yīng)，結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)校正曲線(xiàn)能用溶液配制的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，一個(gè)驗(yàn)證的方法適合于任何基質(zhì)，這是一個(gè)革命性的突破。
　　顯而易見(jiàn)，用于樣品的預(yù)處理的固相萃取產(chǎn)品，應(yīng)該有生產(chǎn)品質(zhì)的重現(xiàn)性， 易操作性，能夠按照顧客的要求制成96孔或392孔作自動(dòng)化操作。固相萃取產(chǎn)品本身不應(yīng)有雜質(zhì)洗脫，在一點(diǎn)上聚合物機(jī)制的固相萃取產(chǎn)品就達(dá)不到要求。
   業(yè)界許多人的慣性思維總是把固相萃取當(dāng)作HPLC、GC-MS或LC-MS/MS分析前的一個(gè)“低端”樣品預(yù)處理技術(shù)：這是大錯(cuò)特錯(cuò)的！任何從事生物分析、農(nóng)殘分析、食品安全分析、進(jìn)出口檢測(cè)、毒品分析、環(huán)境分析等領(lǐng)域的第一線(xiàn)實(shí)驗(yàn)室經(jīng)理、科學(xué)家一級(jí)監(jiān)管部門(mén)的主管都知道，樣品分析80%的人力、時(shí)間都花費(fèi)在樣品預(yù)處理上。更為重要的是, 最終樣品分析數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確主要取決于樣品預(yù)處理技術(shù)的合適選擇和應(yīng)用。液-液萃取不僅使用大量有毒的有機(jī)溶劑，而且不可能消除基質(zhì)效應(yīng)。因此，固相萃取作為樣品預(yù)處理的關(guān)鍵是實(shí)實(shí)在在的高新核心技術(shù)。

　　獨(dú)特的超臨界流體封端技術(shù)最大程度了消除硅醇基的酸性效應(yīng)

 

在超臨界流體狀態(tài)下, 擴(kuò)散系數(shù)是固-液回流狀態(tài)的1000倍。因此封端試劑最大程度封閉活性硅醇基。鍵合相在非水滴定和表面Zeta電勢(shì)測(cè)定中沒(méi)有可探測(cè)出的電荷, 堿性化合物峰形好。