蘇木精-伊紅（HE）染色

 

染液制備：

1.      蘇木精染液

（1）    稱取0.5g蘇木精、5.0g銨礬或鉀礬和0.1g碘酸鈉加溫溶于70ml蒸餾水中；

（2）    加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混勻后過(guò)濾即成母液；

（3）    母液可長(zhǎng)期保存。用蒸餾水以1：20稀釋母液即成工作液。工作液也較長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存，但每次染色前宜過(guò)濾，去除氧化膜；

2.      伊紅染液

伊紅有醇溶性與水溶性之分。將0.5g伊紅溶于100ml 70%乙醇或蒸餾水即成工作液；

 

染色步驟：

1.      用37℃的溫BSS漂洗3次，每次20s—1min；

2.      用中性福爾馬林固定30min；

3.      用蒸餾水漂洗1次，再用蒸餾水稀釋的蘇木精液（1/20）染10min；

4.      先用自來(lái)水沖洗幾次，而后置入1% NaHCO₃液中漂洗至藍(lán)紫色；

5.      在放入伊紅水溶液中染30s—1min；

6.      用蒸餾水沖洗，迅速通過(guò)丙酮2次，每次3—5min；

7.      通過(guò)2：1丙酮/二甲苯3次，每次1—2min；

8.      通過(guò)1：2丙酮/二甲苯3次，每次1—2min；

9.      放入純二甲苯5—10min，用光學(xué)樹(shù)脂封片后觀察；

10.    把蓋片置載物玻片上，令小蓋片細(xì)胞面向上，用樹(shù)膠封存，再覆以較大蓋片；

 

結(jié)果：

原代細(xì)胞核染成紅色，胞質(zhì)染成藍(lán)紫色；