抗體選擇指南

 

    抗體親和層析原理是蛋白 A和蛋白 G對(duì)不同來源的IgG的Fc-區(qū)具有高度親和性和特異性。這些蛋白被固定在我們的許多填料上，產(chǎn)生了從腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和血清中分離IgG和IgG亞類的極好方法。關(guān)于抗體親和純化的全部產(chǎn)品系列，見下頁抗體親和填料和層析柱選購指南。

 

    蛋白A (Protein A) 來源于金黃色葡萄球菌的一個(gè)株系，它含有5個(gè)可以和抗體IgG分子的Fc段特異性結(jié)合的結(jié)構(gòu)域，可以特異性的和樣品中的抗體分子結(jié)合，而使其他雜蛋白流穿，具有極高的選擇性，通常一步親和層析就可達(dá)到超過95%的純度。ProteinA sepharoseCL-4B，是將從金黃色葡萄球菌表達(dá)純化出蛋白A通過CNBr的方法偶聯(lián)在sepharose CL-4B的介質(zhì)上，可以純化體液或細(xì)胞培養(yǎng)液中的免疫球蛋白。nproteinA sepharose4FF，nprteinA即為天然 (Native ProteinA)，表示其在生產(chǎn)過程中沒有引入任何動(dòng)物來源的組分。rproteinA sepharose4FF，重組的蛋白A (rProtein A)，經(jīng)基因工程改造后含有一個(gè)C末端半胱氨酸，可以單一位點(diǎn)定向偶聯(lián)于瓊脂糖骨架上，有效降低空間位阻，增加了與IgG 的結(jié)合能力。同時(shí)配基在發(fā)酵和純化過程中沒有引用人源的IgG，避免了人源IgG的污染風(fēng)險(xiǎn)。rmpProteinA，多位點(diǎn)附著的技術(shù)，保證更低的配體的脫落。一步高度純化單抗和多抗。

 

    2005年GE推出了新一代的MabSelect ，是第一個(gè)使用高流速瓊脂糖凝膠 ( High flow Agarose) 作為骨架的新型蛋白A層析介質(zhì)，專為大規(guī)�？贵w純化而設(shè)計(jì)。相比傳統(tǒng)Fast Flow填料，高流速瓊脂糖具有高流速高載量，更低的配體脫落，易于清洗與除菌消毒，壽命更長、更經(jīng)濟(jì)，適合快速高效的進(jìn)行抗體生產(chǎn)和放大，已經(jīng)成為治療用單抗純化和放大的標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì)。2011年又推出了新產(chǎn)品MabSelect LX，更高的動(dòng)態(tài)載量60mgMab/ml，更大的降低了成本

 

    蛋白G是G族鏈球菌的一種細(xì)胞表面蛋白，是Ⅲ型Fc-受體，與IgG結(jié)合類似于蛋白 A，以非免疫機(jī)制結(jié)合。我們提供的是其天然蛋白的白蛋白結(jié)合區(qū)域被基因敲除后在大腸桿菌中表達(dá)的重組蛋白形式(HiTrap Protein G HP、Ab SpinTrap、ProteinG Sepharose 4 Fast Flow、GammaBind G Sepharose和GammaBindPlus Sepharose)，重組蛋白 G含有兩個(gè)Fc結(jié)合區(qū)。也提供預(yù)裝有Protein G SepharoseHigh Performance填料的Ab SpinTrap層析柱，它可以通過離心的方式方便地捕獲和純化單克隆和多克隆抗體。

 

    盡管蛋白A和蛋白G親和填料在許多方面是類似的，但對(duì)IgG的特異性卻不同。對(duì)一般抗體捕獲蛋白G親和填料是一種很好的選擇，因?yàn)樗�可以結(jié)合廣范圍的真核類生物表達(dá)的IgG，并且可以結(jié)合更多的IgG亞型。

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