96 通道移液器在生物科技行業(yè)應(yīng)用方法集

 

生物科技行業(yè)里，有越來越多的應(yīng)用或者開發(fā)需要放在 96 孔盤上進(jìn)行以增加測試的數(shù)量，或者提高反應(yīng)的平行度。合理運(yùn)用96 通道移液器，能充分發(fā)揮出96 孔盤的優(yōu)勢。

 

核酸提取，也許是現(xiàn)代生物學(xué)中最基礎(chǔ)也最重要的工作了。疾病診斷，遺傳育種，藥物篩選，發(fā)育表達(dá)，分子進(jìn)化… … 幾乎生物科學(xué)中每一個(gè)部分的研究，都離不開分離純化所需要的核酸組分。而且，不少研究還是要通過數(shù)量的增加來獲得可靠的數(shù)據(jù)。

 

對于核酸提取設(shè)備，對它的要求就是可靠，可重現(xiàn)，運(yùn)行費(fèi)用低。但目前市面上的多數(shù)自動(dòng)化核酸提取設(shè)備，要么是處理通量不夠，要么是運(yùn)行成本太高，要么就是性價(jià)比太低，都不能讓多數(shù)研究者真正滿意。

 

巧用 96 通道移液器，進(jìn)行96 個(gè)樣品的平行提取，大大節(jié)省工作時(shí)間以及提高提取產(chǎn)物質(zhì)量，結(jié)果重現(xiàn)可靠，一致性非常好。

 

利用 96 通道移液器，配合其他輔助設(shè)備進(jìn)行的核酸提取組合方案，試劑開放，真正高通量，性價(jià)比最高，是廣大研究人員的精明之選。特別適合于流行病學(xué)、轉(zhuǎn)基因育種、生物標(biāo)志物篩選等研究課題。

 

二、藥物正交篩選

用正交的方法進(jìn)行多種藥物最有效工作濃度的篩選，常常需要花費(fèi)許多精力來配置溶液，非常的繁瑣而且容易出錯(cuò)，包括加錯(cuò)孔或者加錯(cuò)量。巧用96 通道移液器，能大大節(jié)省工作時(shí)間以及提高組合的配置質(zhì)量，得到更可重現(xiàn)的結(jié)果。

兩種藥物的正交篩選：

 

只需要配置每種溶液的系列濃度梯度，兩次移液，就能配置成 96 個(gè)不同的組合溶液！

8 * 12 = 96，2 次移液

 

三種藥物的正交篩選：

只需要配置每種溶液的系列濃度梯度，12 次移液，就能配置成4*96 個(gè)不同的組合溶液！

8 * 12 * 4 = 384，12 次移液（3 次移液做成1 塊盤），用時(shí)6 分鐘。

 

巧用 96 通道移液器，只需要20 分鐘（包括系列稀釋3 種藥物的時(shí)間），輕松完成384 種藥物配方組合的配置，全程自主掌控，可靠放心，免去操作全自動(dòng)移液平臺(tái)的各種編程的操作以及擔(dān)心。

 

三、細(xì)胞活力檢測

用細(xì)胞作為模型來進(jìn)行藥物篩選，已經(jīng)是藥物開發(fā)的常規(guī)手段，無論是藥效研究還是毒理研

究，都非常依賴細(xì)胞活力測試。

 

標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞活力測試方法都是建立在 96 孔盤上的。對細(xì)胞鋪板的量以及各種試劑的添加量，以及反應(yīng)一致性，都有比較高的要求。引入96 通道移液器，能讓本測試更具重現(xiàn)性，結(jié)果更可靠，有效減輕操作者的工作強(qiáng)度。

該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測定等，是廣被認(rèn)可的測試方法。其主要的誤差來源于MTT 以及DMSO添加的量，反應(yīng)時(shí)間的差異。高通量移液器能有效消除這些差異，讓實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真正反映了藥物對于細(xì)胞的影響，必能讓本方法更好的服務(wù)于生命科學(xué)特別是藥物開發(fā)方面的研究。

 

四、發(fā)酵菌株的高通量篩選

對于基因重組的或者是誘導(dǎo)突變的工程菌的目標(biāo)產(chǎn)物表達(dá)能力的篩選，是得到高表達(dá)、遺傳穩(wěn)定的工藝菌種的必要手段。

 

傳統(tǒng)的菌種篩選都是基于培養(yǎng)平板的，能得到單克隆菌株。但對于發(fā)酵表達(dá)情況的篩選，只能用燒瓶來開展，然后測量發(fā)酵液里面特定物質(zhì)的含量或者目標(biāo)物質(zhì)的生物活性，后期的工作量非常大。

 

已經(jīng)有報(bào)道指出，用 96 深孔盤來培養(yǎng)單克隆的多孢菌是可行的（羅莉斯等，2010）。而且，對發(fā)酵產(chǎn)物的檢測，如果能建立用96 孔盤來整板測量的高通量方法，能大幅節(jié)省后期對產(chǎn)物進(jìn)行定量或者定性測量的時(shí)間，達(dá)到很高的工作效率（齊西珍等，2011；宗莎莎等，2011）

建立基于 96 孔板的工程菌株高通量篩選方法后，與傳統(tǒng)搖瓶篩選方法相比，“該方法操作簡單方便、節(jié)省了大量試劑和實(shí)驗(yàn)室空間、縮短了菌株篩選周期、加大了菌株初篩數(shù)量、可高效、低成本、快速篩選多殺菌素高產(chǎn)菌株”（羅莉斯等，2010）。

 

高通量篩菌技術(shù)在國內(nèi)剛起步。但這種技術(shù)必須不斷向微型化、微量化、廉價(jià)化和自動(dòng)化

方向發(fā)展，才是國內(nèi)未來高通量篩菌研究的主要趨勢。

 

五、酶標(biāo)板的包被

對于生物試劑企業(yè)來說，酶標(biāo)板的包被是控制產(chǎn)品質(zhì)量最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)�？着c孔之間，板與板之間必須保持高度的一致性才能體現(xiàn)出產(chǎn)品的穩(wěn)定性。另外，生產(chǎn)的工作量又特別的大，每天需要包被數(shù)千塊的板也是常事。

 

現(xiàn)行的工作方式：

傳統(tǒng)的熟練工人配合多道移液器組合的模式，存在人員穩(wěn)定性、設(shè)備差異性、工作強(qiáng)度大的

問題，已成為提高產(chǎn)品可靠性以及擴(kuò)大生產(chǎn)能力的瓶頸問題。

 

高投入的解決方案：

選用全自動(dòng)的生產(chǎn)設(shè)備，無疑能夠克服現(xiàn)行方式的問題，但也存在投入成本過大，調(diào)試時(shí)間

長，生產(chǎn)流程重構(gòu)，故障停機(jī)，定期維護(hù)等問題，并不適合所有生物試劑企業(yè)。

 

最高性價(jià)比方案：

更有效的途徑是提高單兵作戰(zhàn)能力，讓每個(gè)操作人員在同樣的工作時(shí)間內(nèi)完成更多的工作

量，而且切實(shí)降低其工作強(qiáng)度。這就需要改善生產(chǎn)工具，也就是移液器。

噴液準(zhǔn)確性（150ul，一吸6 噴）：

板間差異度：整板平均值，板間相差在 2%以內(nèi)；

板內(nèi)差異度：任意取 20 孔，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD < 1%。

工作速度（150ul，一吸6 噴）：

理論速度（無限溶液，不用整理盤）：1 分鐘完成一吸6 噴

實(shí)際速度（添加溶液，堆放目標(biāo)盤）：1 小時(shí)完成250 盤，1 天工作4 小時(shí)完成1000 盤。

采用活塞移液的 96 通道移液器，不需要因應(yīng)液體的粘度、溫度的不同而進(jìn)行體積校正的繁

瑣操作，也無需擔(dān)心針管堵塞造成的偏差或者錯(cuò)漏情況，死體積極小，維護(hù)費(fèi)用低，是追求

可靠、穩(wěn)定的各種生物試劑廠家的首選生產(chǎn)設(shè)備。

 

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