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微透析儀器操作步驟

瀏覽次數(shù):3369 發(fā)布日期:2013-3-29  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

微透析儀器操作步驟(參考)

1. 去除老鼠頭皮,清潔頭蓋骨。在頭蓋骨上面選定的位置(參看定位儀圖譜)打小洞(用精密高速鉆機(jī)MF5360,環(huán)型鉆頭MF5176----這個(gè)孔洞用于放探針底座),這個(gè)小洞需要打穿頭蓋骨。環(huán)型鉆頭的特點(diǎn)是鉆屑少。

2. 在這個(gè)孔洞的附近打2-3個(gè)孔(使用鉆頭MF5362),用于安裝螺絲MF5182,目的是增加探針底座的與頭蓋骨的粘合力,使探針底座不容易脫落。

3. 重要的是:需要精確選準(zhǔn)探針埋置的部位,才能夠得到最多的微透析樣品。使用立體定位儀MD3000,把探針底座(MD2251或者M(jìn)D2250)埋入上面的孔洞里面。用粘和劑MD1300固定探針底座和螺絲。

4. 使用立體定位儀MD3000把探針(例如MD2200)插入探針底座。

5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,選擇推進(jìn)控制器(MD1000或者M(jìn)D1020)的流速。把推進(jìn)控制器上面的連接扁線插入微量推進(jìn)器MD1001的插孔。

6. 在注射器(例如MDN0100)中灌入實(shí)驗(yàn)需要的液體,放在微量推進(jìn)器上面。在這個(gè)微量推進(jìn)器上面,只可以放1個(gè)注射器。如果需要在1個(gè)微量推進(jìn)器上面放2—3個(gè)注射器,可以購(gòu)買(mǎi)注射器架子MD1002 ,在MD1002上面可以放2—3個(gè)注射器。

7. 把已經(jīng)埋置探針的老鼠放入清醒系統(tǒng)MD1404的籠子內(nèi)。在老鼠身體上面放項(xiàng)圈MF5371,把清醒系統(tǒng)里面的鉤子,鉤住MF5371,所以,當(dāng)老鼠走動(dòng)的時(shí)候,這個(gè)鉤子也轉(zhuǎn)動(dòng),同時(shí),上面的光電傳感器向儀器發(fā)出老鼠走動(dòng)的信號(hào),儀器就會(huì)使清醒系統(tǒng)的底盤(pán)轉(zhuǎn)動(dòng),當(dāng)然,這個(gè)轉(zhuǎn)動(dòng)是與老鼠走動(dòng)的方向相反,得到最最重要的結(jié)果----使老鼠身體上面的2個(gè)管子(輸液管子和透析液管子)不會(huì)纏繞、堵塞,使2個(gè)管子里面的液體流動(dòng)暢通。

8. 用管子MF5164與接頭MD1510連接注射器----探針,探針的另外1個(gè)接口用管子和接頭連接到恒溫冷凍收集器MD1201等。

9. 檢查各種連接無(wú)誤。

10. 開(kāi)通清醒系統(tǒng)MD1404電源。

11. 在恒溫冷凍收集器MD1201里面放置收集管,開(kāi)通恒溫冷凍收集器電源,設(shè)置恒溫冷凍收集器5個(gè)參數(shù)。

12. 開(kāi)通推進(jìn)控制器電源,微透析儀器開(kāi)始工作。

建議

微透析實(shí)驗(yàn)與許多實(shí)驗(yàn)不同,很多方面取決于操作者的技能水平。

1. 埋置探針的部位要準(zhǔn)確。埋置探針的深度也要準(zhǔn)確。選擇探針的膜的長(zhǎng)度需要合適。目的是得到最多的微透析樣品。

2. 操作探針需要細(xì)心,需要避免探針的膜的損壞,從而延長(zhǎng)探針的壽命和使用次數(shù)。

3. 探針使用前的處理。以及在使用間隔時(shí)候的處理,沖洗,浸泡..,目的也是延長(zhǎng)探針的壽命和使用次數(shù)。

4. 在連接注射器、探針、液體選擇開(kāi)關(guān)、恒溫冷凍收集儀,等等系統(tǒng)的時(shí)候,需要細(xì)心,連接管、接頭,與上述物件,套/插 時(shí)候,一方面,需要防止漏液和堵塞,另一方面,也要防止連接管和接頭的損壞。

5. 探針,連接管,接頭,是消耗品,細(xì)心、正確的操作方法,能夠延長(zhǎng)它的使用壽命和次數(shù)。

6. 灌流液體的配制,流速的選擇。恒溫冷凍收集儀的參數(shù)(延時(shí)時(shí)間、收集時(shí)間等)選擇。等等,都需要學(xué)習(xí)和自己經(jīng)驗(yàn)的積累總結(jié)。尤其是埋置探針,是得到微透析液體量多質(zhì)優(yōu)的重要步驟,操作者的手法非常重要。

要使實(shí)驗(yàn)成功,操作者的技能水平的重要性,比儀器本身還要重要。優(yōu)秀的操作者,容易得到微透析液,量多質(zhì)好,消耗品(探針、連接管、接頭)的使用壽命長(zhǎng)、次數(shù)多。

小提示:當(dāng)微量推進(jìn)器工作時(shí),由于流速很慢,幾分鐘才推出一滴液體,人眼根本看不出微量推進(jìn)器是否在工作,所以有時(shí)候操作人員在心理上會(huì)擔(dān)心微量推進(jìn)器沒(méi)有工作。有個(gè)簡(jiǎn)單的方法:在微量推進(jìn)器一端的黑色圓柱上沾上一個(gè)小白點(diǎn)(白膠帶或者白粘紙),當(dāng)微量推進(jìn)器工作時(shí),黑色圓柱會(huì)很慢速地轉(zhuǎn)動(dòng),小白點(diǎn)會(huì)改變位置,說(shuō)明微量推進(jìn)器工作正常,打消了心理顧慮。

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