為了檢測掌葉半夏中的miRNA并分析其與半夏miRNA的表達(dá)差異,研究人員根據(jù)miRNAs的保守性,從miRBase數(shù)據(jù)庫上搜集了43個(gè)植物物種的成熟體miRNAs序列,采用定制化miRNA芯片對掌葉半夏的miRNAs進(jìn)行檢測(定制化miRNA芯片服務(wù)由聯(lián)川生物完成)。從掌葉半夏和半夏中檢出共有的屬于22個(gè)miRNA家族的101個(gè)miRNAs,其中有21個(gè)miRNAs在兩個(gè)品種間存在表達(dá)差異。研究人員進(jìn)一步對差異表達(dá)miRNAs的靶基因進(jìn)行GO富集分析,發(fā)現(xiàn)這些miRNAs主要影響復(fù)制,轉(zhuǎn)錄因子活性和植物發(fā)育過程。
為了闡明miRNA的靶向調(diào)控功能,研究人員從掌葉半夏葉子中構(gòu)建了一個(gè)降解組文庫,并對其進(jìn)行高通量測序(降解組測序服務(wù)由聯(lián)川生物完成)。結(jié)果表明,共有18個(gè)轉(zhuǎn)錄本被鑒定為miRNA的靶基因,進(jìn)一步分析表明,miR156和miR529可能共同抑制SPL14(SBP-box基因家族)發(fā)揮作用。
本研究為進(jìn)一步研究掌葉半夏中miRNA與其靶基因的調(diào)控作用打下了扎實(shí)的基礎(chǔ)。
* Dong M, Yang D, Lang Q, Zhou W, Xu S, Xu T. (2013) Microarray and Degradome Sequencing Reveal MicroRNA Differential Expression Profiles and Their Targets in Pinellia pedatisecta. PLoS One 25;8(9):e75978.. [article]