二手煙對細(xì)胞暴露及其對呼吸道病毒感染的易感性研究

二手煙對細(xì)胞暴露及其對呼吸道病毒感染的易感性研究目標(biāo)是了解二手煙的暴露對病毒性呼吸道疾病的形成有何促進(jìn)作用。本研究項目的目的是確定在病毒感染中二手煙霧暴露的影響，在肺上皮細(xì)胞模型，使用兩種流行的人類呼吸道病毒：鼻病毒和腺病毒。

腺病毒（AD）是無包膜DNA病毒，是兒科需要住院治療的呼吸系統(tǒng)疾病的重要病原體。這些病毒也是造成急性呼吸道傳染性疾病爆發(fā)的主要原因。B類（如血清3型，7型和11型），C類（如血清5型），和E類（例如血清4型）是最常見的呼吸道病原體。

我們推測，通過二手煙的暴露，增加受體分子的有效性和促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入，從而增加呼吸道病毒的感染。該研究的理論基礎(chǔ)是，確定二手煙暴露增加呼吸道感染易感性的機制， 進(jìn)而進(jìn)一步干預(yù)以減少呼吸道疾病。這一假設(shè)將通過三個明確的目標(biāo)進(jìn)行驗證：

確定二手煙暴露對呼吸道上皮細(xì)胞的滲透性及病毒受體的數(shù)量和有效性的影響。

 

目標(biāo) 2.

確定二手煙暴露在體外對呼吸道病毒感染的氣道上皮細(xì)胞的影響。

 

目標(biāo) 3.

 

香煙相對濕度保持30%~40%。實驗中，細(xì)胞暴露于香煙煙霧8分鐘/次。主流香煙煙霧的每次吸煙量保持30.10ml。側(cè)流香煙煙霧保持在78.36ml。采用Cultex細(xì)胞暴露系統(tǒng)（Hannover,Germany），細(xì)胞體外的氣-液（ALI）培養(yǎng)，并在氣-液界面進(jìn)行香煙煙霧的高效暴露。

 

  

 

可以觀察到，在MOI 1 PFU／cell的3個獨立感染實驗3天后，總的傳染性病毒產(chǎn)量沒有大的變化。然而，在煙霧暴露和感染Ad3p細(xì)胞中，傳染病毒產(chǎn)量有明顯的增加趨勢。

 

 

  

 

   在1.0 PFU/cell MOI感染Ad3p，Ad4p和Ad5p6小時和18小時后，暴露于主流煙和測流煙，采用懸浮芯片檢測腺病毒感染Calu3細(xì)胞促炎細(xì)胞因子反應(yīng)。

 

總的來說，目前的實驗結(jié)果表明，如腺病毒，暴露于主流或側(cè)流煙霧沒有顯著提高受感染細(xì)胞的鼻病毒的復(fù)制。在MOI為0.1，0.5，1.0和5.0 PFU/cell的數(shù)據(jù)集之間沒有觀察到顯著可測量的差異。令人鼓舞的發(fā)現(xiàn)是，可以在transwell系統(tǒng)的頂部，細(xì)胞和基底室單獨感染腺病毒的產(chǎn)量評估，并進(jìn)行類似的鼻病毒實驗，以提高我們的檢測差異的能力。

 

 

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