Taq DNA聚合酶（with MgCl2 in Buffer）使用說(shuō)明書(shū)

『注意事項(xiàng)』
1.    長(zhǎng)期儲(chǔ)存（非頻繁使用）于-70ºC；每天或每周使用儲(chǔ)存于-20ºC。盡量避免多次凍融，勿暴露在溫度波動(dòng)較大之處，這些波動(dòng)對(duì)產(chǎn)品的穩(wěn)定性有一定影響。
2.    建議在100l反應(yīng)液中，酶的使用量為1~2.5l。過(guò)多酶量和過(guò)長(zhǎng)的延伸時(shí)間可能會(huì)引起非特異擴(kuò)增條帶。
3.    為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果，建議使用本公司配套緩沖液及相關(guān)試劑。
4.    擴(kuò)增結(jié)果與反應(yīng)體系、Mg2+濃度、引物、循環(huán)參數(shù)等因素有關(guān)。為了減少不必要的優(yōu)化過(guò)程、節(jié)省時(shí)間和保證試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定可重復(fù)，推薦使用本公司的PCR SmartMix。

產(chǎn)品編號(hào)：TQ-01/02/03/04

MyLab® Taq DNA聚合酶
（with MgCl2 in Buffer）

使用說(shuō)明書(shū)
『規(guī)格』5U/l; 100l; 500U。
『特點(diǎn)』
本制品是分子量為94 kDa的耐熱的DNA聚合酶。是將棲熱水生菌（Thermus aquaticus）DNA Polymerase的基因克隆后，在大腸桿菌中表達(dá)后，分離純化而得到的。它與天然的Taq DNA聚合酶有相同的功能。該酶反應(yīng)需Mg2+參與，它以雙鏈DNA為模板催化核苷酸從5’向3’末端形成雙鏈DNA。該酶不具有5’-3’核酸外切酶的活性。該產(chǎn)品主要用于DNA的PCR擴(kuò)增，DNA測(cè)序等。PCR產(chǎn)物3' 端為A，可用于T/A克隆。在70~75ºC時(shí)，DNA聚合的速度每秒大于75個(gè)堿基。
『組成』
Taq DNA Polymerase: 500U (5U/l; 200l)
10 PCR Buffer: 1.5ml，組份為：
100 mM Tris-HCl (pH8.7)
500 mM KCl
15 mM MgCl2
0.1%白明膠
其它穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑
『活性單位』
1單位酶定義為在72ºC、30min內(nèi)催化10nmol同位素標(biāo)記的dNTP加入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。
『保存條件』-20℃保存。
『有效期』12個(gè)月。

『質(zhì)量控制』
1.    Overdigest (OD) 檢測(cè)：30U Taq DNA 聚合酶與1g λDNA在72ºC下反應(yīng)16小時(shí)后，用瓊脂糖凝膠電泳未檢出降解的λDNA。
2.    切口酶檢測(cè)：30U Taq DNA 聚合酶與超螺旋質(zhì)粒DNA在72ºC下反應(yīng)4小時(shí)后，用瓊脂糖凝膠電泳未檢出切口酶或線性DNA帶。
3.    熱穩(wěn)定性檢測(cè)：92ºC時(shí)，每2.5U Taq DNA 聚合酶在緩沖液中的半衰期長(zhǎng)于1小時(shí)。
4.    SDS-PAGE檢測(cè)純度大于99%以上。
『適用范圍』
常規(guī)PCR/反轉(zhuǎn)錄PCR/熒光定量PCR/DNA測(cè)序/平端PCR產(chǎn)物加A等。
『使用方法』
注意：以下舉例多數(shù)情況下可參考。實(shí)際反應(yīng)條件因模板、引物等的結(jié)構(gòu)不同而各異，需根據(jù)實(shí)際情況，設(shè)定最佳反應(yīng)條件。
以人基因組DNA 為模板，擴(kuò)增1kb的片段，反應(yīng)體系為25l。
10PCR Buffer              2.5l
Primer 1 (10M)              1l
Primer 2 (10M)              1l
dNTP (10mM)                0.5l
Taq DNA Polymerase        1~2.5U
Template                    1g
ddH2O                      補(bǔ)至25l
如反應(yīng)體系不同，可按此比例增加或減少用量�；靹蚝�，置于PCR儀中，按設(shè)定的程序運(yùn)行即可。反應(yīng)結(jié)束后取5l反應(yīng)產(chǎn)物，瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。
本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床治療、食品等用途。