下肢缺血（血管再生）實驗方案

 

 

下肢缺血試驗應(yīng)用血管新生是缺血性心血管疾病血流阻塞后改善血流灌注的重要機(jī)制。然而,目前臨床上尚缺乏一種簡單、無創(chuàng)和特異的直接評價血管新生的方法。下肢缺血試驗是進(jìn)行血管新生評價的重要試驗。方法是使用大鼠或小鼠予結(jié)扎一側(cè)下肢股動脈制備下肢缺血模型,另一側(cè)下肢作為對照組。術(shù)后使用激光多普勒血流成像儀對雙后肢進(jìn)行掃描成像，分析后肢血流量。然后每周對雙后肢進(jìn)行掃描成像，分析后肢血流恢復(fù)狀況。

 

 

 

下肢缺血試驗是進(jìn)行缺血性心血管病與治療性血管新生研究的重要方法，可以將促血管新生因子注入體內(nèi)，促進(jìn)缺血局部血管新生與側(cè)支循環(huán)，改善組織的血液供應(yīng)與功能，進(jìn)而評價促血管新生因子的作用。促血管新生因子可以是促血管新生藥物、蛋白、基因和干細(xì)胞治療。

除心臟血管疾病研究外，還可使用下肢缺血試驗評價糖尿病、外周血管疾病、傷口愈合等方面的血管新生研究。

所需設(shè)備

                                                  

MoorLDI2-HIR點掃描激光多普勒血流成像（Gene&I，北京）  AMG小動物麻醉機(jī)（Gene&I，北京）

 剃毛刀和脫毛膏

試驗過程

將大鼠或小鼠使用麻醉機(jī)進(jìn)行麻醉。

將后肢使用脫毛膏進(jìn)行脫毛處理。

剪開其中一側(cè)后肢皮膚，分離肌肉分離出股動脈。

使用縫合線在緊貼腹股溝處對股動脈進(jìn)行結(jié)扎。

縫合傷口，使用激光多普勒掃描儀對雙下肢進(jìn)行血流掃描成像。

分析缺血側(cè)下肢與正常側(cè)血流灌注量對比。

試驗結(jié)果

手術(shù)后當(dāng)天，缺血側(cè)肢體相對于正常側(cè)缺血率可達(dá)80-90%。

在使用促血管新生因子后，可觀察到缺血側(cè)肢體血流恢復(fù)過程。

Reference

Aicher A., Heeschen C., Sasaki K., Urbich C., Zeiher A. M., Dimmeler S. 2006

Low-energy shock wave for enhancing recruitment of endothelial progenitor cells: a new modality to increase efficacy of cell therapy in chronic hind limb ischemia.

Circulation, 114 (25), pp 2823-30

Chalothorn D, Zhang H, Clayton J. A, Thomas S. A, Faber J. E, 2005.

Catecholamines augment collateral vessel growth and angiogenesis in hindlimb ischemia.

American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology Published 1 August 2005 Vol. 289 no. 2, H947-H959.

Crawford R. S., Albadawi H., Atkins M. D., Jones J. E., Yoo H. J., Conrad M. F., Austen Jr W. G., Watkins M. T. 2010

Postischemic poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibition reduces ischemia reperfusion injury in a hind-limb ischemia model.

Surgery, 148 (1), pp 110 - 118

Tritsaris K., Myren M., Ditlev S. B., Hübschmann M. V., van der Blom I., Hansen A. J., Olsen U. B., Cao R. , Zhang J., Jia T., Wahlberg E., Dissing S., Cao Y. 2007

L-20 is an arteriogenic cytokine that remodels collateral networks and improves functions of ischemic hind limbs.

Proc Natl AcadSci U S A.104 (39), pp 15364-9

Turgeon J., Dussault S., Haddad P., Groleau J., Ménard C, Michaud S. E., Maingrette F., Rivard A. 2010

Probucol and antioxidant vitamins rescue ischemia-induced neovascularization ………. exposed to cigarette smoke: Potential role of endothelial progenitor cells.

Atherosclerosis 208, spp 342–349

吉安得爾下肢缺血國內(nèi)合作單位

軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院6所

復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院

華東師范大學(xué)

北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部

中科院生物物理所

四川大學(xué)華西再生醫(yī)學(xué)研究中心

四川醫(yī)科大學(xué)