【銳賽小課題】細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定 這些問(wèn)題你遇到過(guò)嗎？

1、 問(wèn)：測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的意義是什么？

答：細(xì)胞生長(zhǎng)曲線是測(cè)定細(xì)胞絕對(duì)生長(zhǎng)數(shù)的常用方法，也是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo)，是培養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)之一。因?yàn)榧?xì)胞太小，無(wú)法測(cè)單個(gè)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，所以測(cè)細(xì)胞群體的生長(zhǎng)曲線。

2、 問(wèn)：如何選擇細(xì)胞接種數(shù)？

答：可根據(jù)細(xì)胞傳代培養(yǎng)過(guò)程中接種數(shù)及細(xì)胞生長(zhǎng)周期進(jìn)行計(jì)算，細(xì)胞接種數(shù)因細(xì)胞的不同而不同。

3、細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)為什么要用臺(tái)盼藍(lán)染色？

答：加入臺(tái)盼藍(lán)后，活細(xì)胞不著色，臺(tái)盼藍(lán)著色的細(xì)胞呈深藍(lán)色，是不健康或已死亡的細(xì)胞，不能計(jì)數(shù)。

4、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線測(cè)定時(shí)為什么要做重復(fù)孔？

答：測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)選擇 3 個(gè)復(fù)孔，每孔分別計(jì)三次，取其平均值，目的是減小操作誤差。

5、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線測(cè)定周期是幾天？

答：一般是一個(gè)星期。

6、為什么繪制的細(xì)胞生長(zhǎng)曲線沒(méi)有達(dá)到平臺(tái)期？

答：可能有以下原因：一是細(xì)胞接種密度過(guò)低；二是細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間過(guò)短；三是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不好，使其不能正常增殖。

7、為什么細(xì)胞計(jì)數(shù)第一天，細(xì)胞數(shù)沒(méi)有增加反而減少？

答：一般細(xì)胞傳代后，會(huì)有一個(gè)生長(zhǎng)緩慢的潛伏期，細(xì)胞不增殖，而細(xì)胞會(huì)有正常的死亡，故細(xì)胞數(shù)不增加反而減少。

8、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線還有其他方法繪制嗎？

答：當(dāng)然有。我們提到最多的是直接計(jì)數(shù)的方法，除此以外還有相對(duì)計(jì)數(shù)的方法，該類(lèi)方法首先要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)定細(xì)胞數(shù)和某個(gè)變量的函數(shù)關(guān)系，然后我們只需要測(cè)定每天這個(gè)變量的值便可以計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法。

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