CSY-E96H黃曲霉毒素快速檢測儀方法介紹

CSY-E96H黃曲霉毒素快速檢測儀方法介紹

黃曲霉素快速檢測儀原理：利用用固相酶聯(lián)免疫吸附原理，利用間接競爭ELISA法進(jìn)行測定。用抗原包被微孔板，加入黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)品或樣品進(jìn)行免疫反應(yīng)后，將未與包被抗原結(jié)合的抗體洗去;再加入酶標(biāo)記的抗鼠IgG抗體孵育，加入底物顯色，終止液終止后，用CSY-E96H黃曲霉毒素快速檢測儀在450nm處測定OD值。

快速檢測實驗操作所需的試劑及材料：微孔板 包被有AFB1-BSA；5個濃度的AFB1標(biāo)準(zhǔn)溶液各(1mL)可直接使用；

標(biāo)準(zhǔn)1：0ng/mL 可直接使用；

標(biāo)準(zhǔn)2：1.0ng/mL可直接使用；

標(biāo)準(zhǔn)3：2.0ng/mL 可直接使用；

標(biāo)準(zhǔn)4：5.0ng/mL可直接使用；

標(biāo)準(zhǔn)5：10.0ng/mL 可直接使用；

AFS單克隆抗體溶液(6mL)可直接使用；

酶標(biāo)物(12mL)可直接使用；

顯色液(12mL)；

終止液(6mL)；

濃縮洗液(30mL) ；

空白對照(6ml)微孔板CSY-E96H黃曲霉毒素快速檢測儀(含450nm)：定量分析用；振蕩器，粉碎機(jī)，微量移液器，量筒，漏斗和容量瓶，快速定性濾紙；試劑：氯化鈉(分析純)、甲醇(分析純)、去離子水或蒸餾水

檢驗操作注意事項：標(biāo)準(zhǔn)溶液中含有黃曲霉毒素，應(yīng)特別小心。使用過的玻璃容器及黃曲霉毒素溶液最好用pH7的次氯酸溶液(10%v/v)浸泡過夜。終止液為0.5N硫酸，避免接觸皮膚。不要交換使用不同批號盒中的試劑。

黃曲霉素檢驗實驗樣品前處理：樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存，取5g粉碎的有代表性的樣品，加1.25g氯化鈉及25mL70% 甲醇-水，強(qiáng)力振蕩3分鐘；用快速定性濾紙過濾；取1mL濾液，用1%氯化鈉溶液稀釋10倍；取50μL稀釋液進(jìn)行分析；據(jù)需要可以增加樣品量，但甲醇溶液的量也應(yīng)相應(yīng)增加。

檢驗實驗注意事項和測定程序：每次加樣后立即將所有試劑放回2-8 ℃，每步操作時間控制在5min內(nèi)， 孵育過程中應(yīng)避光。測定程序1. 取所需數(shù)量的板條插入微孔架，記錄樣品及標(biāo)準(zhǔn)的位置。

2. 加入50mL標(biāo)準(zhǔn)品或處理好的樣品到微孔，每個標(biāo)準(zhǔn)和樣品必須使用新的吸頭。

3. 將50mL抗總黃曲霉毒素單克隆抗體使用液加入到每個微孔(注意移液器管尖不要接觸到放進(jìn)孔中的液體，避免交叉污染)，在適當(dāng)位置孔加空白對照液100mL，37℃孵育90min。

4. 甩掉孔中液體，用洗液洗滌微孔板3min×3次，最后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。

5. 每孔加入酶標(biāo)物100mL，37℃孵育60min。

6. 甩掉孔中液體，用洗液洗滌微孔板3min×3次，最后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。

7. 每孔加入顯色液100mL(2滴)，37℃孵育10 min -12min。

8. 每孔加入終止液50mL(1滴)，立即用CSY-E96H黃曲霉毒素快速檢測儀在波長為450nm處測定吸光度值(OD值)。