血液腫瘤常用體內(nèi)外模型總結(jié)&工具病毒使用指南
血液腫瘤主要包括各類白血病、多發(fā)性骨髓瘤以及惡性淋巴瘤。急性白血病占常見惡性腫瘤的第八位，淋巴瘤也是在前十位，并且發(fā)病率逐年升高，多發(fā)性骨髓瘤的整個(gè)發(fā)病率在血液惡性腫瘤里面占10%。
血液腫瘤發(fā)病急，在傳統(tǒng)的放療、化療、骨髓移植等治療方式下，治療周期長、費(fèi)用高昂、過程痛苦，但治愈率卻并不很理想。兒童白血病是兒童發(fā)病率最高的一種惡性腫瘤，近幾年臨床病例數(shù)量更是在逐年上升，已成為兒童腫瘤中的頭號殺手。因此，血液腫瘤的治療研究是當(dāng)務(wù)之急。針對血液腫瘤的研究少不了細(xì)胞和動物模型的加持。怎么選擇這些工具能夠幫助我們更好的進(jìn)行研究，獲得陽性數(shù)據(jù)，發(fā)表論文，申請基金，登上人生巔峰，你有了解嗎？
一、我需要哪種細(xì)胞模型？是否易于操作？
研究過程中，為了驗(yàn)證基因的功能，我們常常需要做基因操作（過表達(dá)，干擾或者敲除）。但由于血液腫瘤細(xì)胞懸浮生長的特性，大大增加了基因操作的難度。慢病毒是一種非常高效的基因操作工具，在大部分懸浮細(xì)胞系中也具有不錯(cuò)的表現(xiàn)。下面幫大家總結(jié)了一些常用血液腫瘤細(xì)胞的特性，以及慢病毒的應(yīng)用情況：
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懸 浮 細(xì) 胞 感 染 小 貼 士↓↓↓
如果細(xì)胞MOI>>100，怎么辦？吉凱對于難感染的懸浮細(xì)胞，也有辦法：
1. 初級版：采用離心感染方法，增加病毒感染時(shí)與細(xì)胞的接觸，從而提高感染效率。如將細(xì)胞培養(yǎng)板密封后，用平角轉(zhuǎn)子離心機(jī)1000g離心15min-1h，再放回培養(yǎng)箱中正常培養(yǎng)；
2. 進(jìn)階版：使用GMP級慢病毒。尤其對于一些原代分離的細(xì)胞，可通過使用高純度的病毒減小病毒感染對細(xì)胞的影響，從而提高感染效率。吉凱擁有國內(nèi)唯一基因工程載體GMP生產(chǎn)車間，特殊純化工藝保證臨床級慢病毒的純度和滴度；
3. 終極版：如果是做CAR-T的老師，還可配合使用吉凱自有專利的CAR-T細(xì)胞感染試劑盒，可保證T細(xì)胞病毒感染效率在40%-80%。
二、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)效果不錯(cuò)，那動物實(shí)驗(yàn)怎么做？
穩(wěn)定性、重復(fù)性較好的動物模型可在腫瘤基礎(chǔ)性研究和抗腫瘤藥物篩選中發(fā)揮重要作用。血液腫瘤常用的動物模型主要有：I皮下移植瘤模型；II血液模型。皮下移植瘤模型較容易建立，易于動態(tài)觀察腫瘤的生長狀態(tài)。血液模型則一般以生存天數(shù)作為觀察終點(diǎn)，用活體成像、病理切片、流式細(xì)胞術(shù)等方法檢測小鼠骨髓及臟器中的腫瘤細(xì)胞生長及浸潤情況。該模型與白血病患者的病理生理狀況較為接近，但實(shí)驗(yàn)難度較大。
三、體內(nèi)外模型選好了，那么我的實(shí)驗(yàn)需要使用哪種慢病毒載體對基因進(jìn)行操作呢？
啟動子、熒光標(biāo)記、抗性標(biāo)簽是我們選擇載體需要考慮的三大要素。實(shí)驗(yàn)不同，這些元件也需要相應(yīng)變化。按例祭出神圖一張，定制你的專屬載體，就是這么簡單！
上海吉凱基因化學(xué)技術(shù)有限公司成立于2002年，擁有BSL-2級別的慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)室。病毒生產(chǎn)線通過ISO9001質(zhì)量管理體系驗(yàn)證，月均定制基因病毒產(chǎn)品包裝超過1000次。慢病毒生產(chǎn)采用6項(xiàng)QC檢測、病毒純度分級純化以及病毒滴度絕對定量檢測確保病毒質(zhì)量。
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之前幾期給大家分享了幾種大癌種的體內(nèi)外模型和工具總結(jié)，想再看看的，請戳下面：
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