如何構(gòu)建腫瘤皮下注射模型？關(guān)鍵三點做到位，腫瘤皮下注射模型so easy!

由于更能模擬人類的生理和病理條件，所以在科研上，動物實驗獲得的結(jié)果，比體外實驗更具有說服力。在腫瘤增殖方向的研究中，也通常會構(gòu)建相應(yīng)的動物模型來開展進一步的研究，皮下注射模型是最常規(guī)的方式。

那么如何構(gòu)建腫瘤皮下注射模型呢？

關(guān)鍵三點做到位，腫瘤皮下注射模型so easy!

選取什么樣的樣本進行注射？

1. 組織塊

選擇生長良好，無液化壞死的魚肉狀的腫瘤組織塊進行接種。這樣的腫瘤組織生命力旺盛，活力強。當(dāng)然，為了保證成功率，接種的時間也很關(guān)鍵，最好是切除后1小時內(nèi)就接種。

組織塊一般來源于臨床的腫瘤樣本，或是在動物體內(nèi)已經(jīng)建立的腫瘤模型樣本。

臨床樣本直接進行接種能較好的保持病人腫瘤的特性，因其含有較全的腫瘤生長微環(huán)境，可以為臨床藥物提供最有效的指導(dǎo)；但是其來源比較困難，在動物體內(nèi)致瘤性也較差。

已經(jīng)建立腫瘤模型的樣本大大提高了其再次成瘤的能力，一個瘤體可以切成十幾二十幾份進行接種，也很大程度上降低了細(xì)胞培養(yǎng)的成本，適合一些成瘤能力較弱的腫瘤細(xì)胞。但是它也是需要先通過細(xì)胞注射建立腫瘤模型，且由于接種的樣本都是靠人工剪切，很難保證接種后成瘤的均一性。

2. 腫瘤組織懸液

選取生長狀態(tài)良好，活力強的腫瘤組織，加生理鹽水或細(xì)胞培養(yǎng)液在勻漿器內(nèi)研磨制成懸液后進行接種。

它一定程度上可以提高成瘤的均一性，但是研磨勻漿的過程容易導(dǎo)致樣本活性降低，使其成瘤能力減弱。

3. 腫瘤細(xì)胞

取處于生長旺盛的腫瘤細(xì)胞進行移植。

腫瘤細(xì)胞接種時可以進行細(xì)胞計數(shù)，可控性較強，均一性也較好。

但是目前常見的一些細(xì)胞系的“年齡“較大，大部分都?xì)v經(jīng)了幾百上千代的培養(yǎng)，細(xì)胞的基因組和行為可能都已發(fā)生了改變。

因此，最終可以根據(jù)研究課題的實際情況進行合理選擇。

要選擇什么樣的動物進行注射呢？

1. BALB/c裸鼠：先天性胸腺發(fā)育缺陷，無被毛，T細(xì)胞功能缺失。其較好的成瘤能力以及無毛便于觀察的特性使其成為腫瘤模型中最常用的工具鼠。

2. NOD-SCID鼠：先天性T、B、部分NK淋巴細(xì)胞聯(lián)合免疫缺陷動物，其免疫缺陷程度比裸鼠更徹底，但是有白色被毛，不便于接種及觀察。

3. NSG/NOG/NCG小鼠：NOD/SCID 鼠遺傳背景，Il2rgnull，其NK細(xì)胞活性幾乎喪失，是目前免疫缺陷程度最高的工具小鼠。但是由于價格比較昂貴，來源較少，目前使用并不廣泛。

通常情況下選擇裸鼠建立腫瘤模型即可，如腫瘤惡性程度非常低，可以考慮使用免疫缺陷程度更徹底的工具小鼠，如需要建立其他特殊的模型則需要根據(jù)實驗?zāi)康倪x用合適品系的實驗動物進行實驗。

要注射在哪些部位？

在選擇接種部位時我們需要根據(jù)不同的癌種/細(xì)胞，不同的實驗?zāi)康牡纫蛩鼐C合考慮。

首先，腫瘤需要通過血管吸收宿主的營養(yǎng)成分以供其生長，所以一般情況下可以接種在腋下、腹股溝、頸背部等血管豐富的地方。

其次，腫瘤需要一定的空間供其生長，所以需要選擇皮膚寬松的地方，如背部兩側(cè)。

另外，還需要考慮到實驗人員觀察、測量的便利性，以及盡可能降低對動物正常生理活動的影響，所以頭部、腹部、四肢附近等部位都不是第一選擇。

最后，就是實驗?zāi)康牡目紤]，或是一些特殊癌種的需求；如乳腺癌接種脂肪墊研究其原位成瘤及轉(zhuǎn)移能力；黑色素瘤接種于皮內(nèi)以提高其致瘤性。

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