蛋白質(zhì)硝酸銀染色試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

主要用途

YIJI蛋白質(zhì)硝酸銀染色試劑是一種旨在使用硝酸銀通過(guò)固著、清洗和染色，直接在聚丙烯酰胺凝膠上顯

色，在清晰背景上產(chǎn)生靈敏度10 納克以下蛋白質(zhì)的銀色條帶的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科

學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于蛋白電泳包括 IEF 的檢測(cè)。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便

捷，敏感度高，顯色清晰，重復(fù)性好。

技術(shù)背景

硝酸銀（AgNO3）的銀離子與蛋白質(zhì)結(jié)合后，化學(xué)還原成可見(jiàn)的金屬銀，而顯示染色效果。通常用于蛋白

聚丙烯酰胺凝膠電泳的檢測(cè)�？膳c質(zhì)譜分析兼容。

產(chǎn)品內(nèi)容

YIJI 固著液(Reagent A) 毫升

YIJI 處理液(Reagent B) 毫升

YIJI 凈化液(Reagent C) 毫升

YIJI 染色液(Reagent D) 毫升

YIJI 顯色液A(Reagent E) 毫升

YIJI 顯色液B(Reagent F) 微升

YIJI 終止液(Reagent G) 毫升

YIJI 脫色液A(Reagent H) 毫升

YIJI 脫色液B(Reagent I) 毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1 份

保存方式

保存 YIJI 染色液(Reagent D)在 4℃冰箱里，避免光照，其余的保存在室溫下，有效保證 12 月

用戶自備

塑料盤(pán)：用于染色的容器

無(wú)離子水：用于稀釋試劑盒溶液

恒速震蕩器：用于染色操作時(shí)的孵育

實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，完成SDS-PAGE 蛋白電泳的運(yùn)行，取出 的膠體，作好定向標(biāo)記，然后進(jìn)行下列操作：

一、固著處理

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1． 準(zhǔn)備 個(gè) 毫升的燒杯，作好 至 號(hào)標(biāo)記

2． 抽取 毫升 YIJI 固著液(Reagent A)到 號(hào)燒杯，加入 毫升無(wú)離子水，混勻

3． 加入到 大小的染色盤(pán)

4． 將聚丙烯酰胺凝膠放進(jìn)染色盤(pán)

5． 在室溫下恒速（ RPM）震蕩器上孵育 分鐘，

6． 同時(shí)抽取 毫升 YIJI 處理液(Reagent B)到 號(hào)燒杯，加入 毫升無(wú)離子水，混勻

7． 小心倒掉染色盤(pán)里的 YIJI 固著液(Reagent A)

8． 加入 毫升 號(hào)燒杯里稀釋的 YIJI 處理液(Reagent B)

9． 在室溫下恒速（ RPM）震蕩器上孵育 分鐘

10．小心倒掉染色盤(pán)里的 YIJI 處理液(Reagent B)

11．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟 兩次

12．同時(shí)抽取 毫升 YIJI 凈化液(Reagent C)到 號(hào)燒杯，加入 毫升無(wú)離子水，混勻

13．加入 毫升 號(hào)燒杯里稀釋的 YIJI 凈化液(Reagent C)到染色盤(pán)

14．在室溫下恒速（ RPM）震蕩器上孵育 分鐘

15．小心倒掉染色盤(pán)里的 YIJI 凈化液(Reagent C)

16．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟 一次

二、染色處理

17．直接抽取 毫升 YIJI 染色液(Reagent D)，加入到染色盤(pán)

18．在室溫下恒速（ RPM）震蕩器上孵育 分鐘

19．小心倒掉染色盤(pán)里的 YIJI 染色液(Reagent D)

20．加入 毫升自備的無(wú)離子水

21．在室溫下恒速（ RPM）震蕩器上孵育 分鐘

22．小心倒掉染色盤(pán)里的無(wú)離子水

23．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟 一次

三、顯色處理

24．同時(shí)抽取 毫升無(wú)離子水到 號(hào)燒杯

25．加入 微升 YIJI 顯色液 A(Reagent E)和 微升 YIJI 顯色液 B(Reagent F)，混勻

26．加入 毫升 號(hào)燒杯里的 YIJI 顯色工作液到染色盤(pán)

27．在室溫下恒速（ RPM）震蕩器上孵育 至 分鐘，蛋白質(zhì)銀色條帶開(kāi)始顯現(xiàn)（注意顯色不要過(guò)深）

28．小心倒掉染色盤(pán)里的 YIJI 顯色工作液（如果染色過(guò)深，見(jiàn)實(shí)驗(yàn)步驟 30）

29．直接加入 毫升 YIJI 終止液(Reagent G)，直至完成所有拍照和分析

四、脫色處理

30．如果染色過(guò)深， 移出 毫升 YIJI 脫色液 A(Reagent H)和 毫升 YIJI 脫色液 B(Reagent I)

到 號(hào)燒杯，加入 毫升無(wú)離子水，混勻

31．加入 YIJI 脫色工作液到染色盤(pán)，

32．在室溫下恒速（ RPM）震蕩器上孵育，直至條帶顏色回到滿意狀態(tài)

33．小心倒掉染色盤(pán)里的 YIJI 脫色工作液

34．加入 毫升無(wú)離子水清洗

五、質(zhì)譜分析預(yù)處理

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