ADV-HR（病毒助感染試劑）使用說明書

一、產(chǎn)品概述：

產(chǎn)品名稱: ADV-HR（病毒助感染試劑）       產(chǎn)品貨號(hào)：FH880805

規(guī)格：1ml（標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格）/100ul（贈(zèng)送規(guī)格）   濃度：1mg/ml 

二、儲(chǔ)存條件：

建議分裝后保存于-20℃，一周內(nèi)使用4℃儲(chǔ)存即可。注意避免反復(fù)凍融！反復(fù)凍融會(huì)嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)效果，請(qǐng)予一周內(nèi)使用！

三、產(chǎn)品原理：

ADV-HR(病毒助感染試劑）試劑通過物理吸附將病毒富集在細(xì)胞表面，從而增加病毒對(duì)細(xì)胞的感染效率，起到助感染的效果。

四、產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)：

1、腺病毒、慢病毒感染均可使用；

2、可顯著提高感染效率；

3、與同類型試劑產(chǎn)品相比毒性更低。

五、實(shí)驗(yàn)舉例：

（一）直接加入法（適用于較易感染的細(xì)胞類型）

1、進(jìn)行病毒感染時(shí)，將ADV-HR試劑直接加入培養(yǎng)皿/孔/瓶中，混勻即可。

2、后續(xù)操作依病毒類型和實(shí)驗(yàn)需要而定。

（二）孵育法（適用于較難感染的細(xì)胞類型）

以6孔板為例：

1、在1.5mL EP管中建立100μL感染體系如下所示：

①ADV-HR                    XuL

         ②病毒                       YμL

         ③細(xì)胞懸液           (100-X-Y) μL （含1.0×10⁶個(gè)細(xì)胞）

 

（其中ADR-HR用量X需參照附2及預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果；病毒用量Y需參照病毒滴度及實(shí)驗(yàn)所需MOI。）

用移液器輕輕吹打混勻，于37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育0.5-1個(gè)小時(shí)。

3、用移液器將感染體系中的細(xì)胞輕輕懸起，全部轉(zhuǎn)移至預(yù)先加有2mL培養(yǎng)液的6孔板中，37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4、后續(xù)操作依病毒類型和實(shí)驗(yàn)需要而定。

六、特別注意：

1、高濃度的ADV-HR具有細(xì)胞毒性，影響細(xì)胞狀態(tài)和感染效率（詳見附2）。我們建議您務(wù)必于目的細(xì)胞中進(jìn)行ADV-HR濃度梯度預(yù)實(shí)驗(yàn)。

2、本試劑僅供與我公司的病毒產(chǎn)品搭配使用，和其他公司產(chǎn)品搭配使用所產(chǎn)生的一切后果均與我公司無關(guān)，本產(chǎn)品的最終解釋權(quán)歸我公司所有。   

附1  ADV-HR使用案例

 

腺病毒感染A549細(xì)胞41h后拍攝的熒光圖片：

慢病毒感染CNE2細(xì)胞72h后拍攝的熒光圖片：

附2  摸索助感染試劑ADV-HR的使用極值實(shí)驗(yàn)

 

實(shí)驗(yàn)規(guī)模：96孔板(定容至100μL)

ADV-HR濃度：1mg/mL

說明：

1、ADV-HR終濃度在0至1.0×10^-2mg/mL之間對(duì)細(xì)胞狀態(tài)無影響；

2、ADV-HR終濃度在2.5×10^-2mg/mL時(shí)細(xì)胞生長緩慢；

3、ADV-HR終濃度在5.0×10^-2至1.0×10^-1mg/mL時(shí)細(xì)胞呈現(xiàn)明顯破碎， 2.5×10^-1至5.0×10^-1mg/mL時(shí)細(xì)胞皺縮甚至停止生長。

建議：

1、請(qǐng)?jiān)谑褂肁DV-HR前于目的細(xì)胞中進(jìn)行濃度梯度預(yù)實(shí)驗(yàn)；

2、建議ADV-HR的使用濃度不超過2.5×10^-2mg/mL。