高效毛細(xì)管電泳的分離原理總結(jié)

1 毛細(xì)管區(qū)帶電泳（Capillary Zone Electroporesis，CZE）

分離原理：毛細(xì)管區(qū)帶電泳出稱為自由溶液毛細(xì)管電泳，是毛細(xì)管電泳是最簡單的一種形式。其分離機理是基于各被物質(zhì)的凈電荷與質(zhì)量之間比值的差異，不同離子按照各自表面電荷密度的差異，以不同的速度在中解質(zhì)中移動而導(dǎo)致分離，它要求緩沖液具有均一性，毛細(xì)管內(nèi)各處具有恒定的電場強度，是目前應(yīng)用最廣的一種分離模式。適用于蛋白質(zhì)、氨基酸、多肽類和離子的分析。毛細(xì)管中除電解液外，無需填充任何物質(zhì)，操作容易，自動化程度高。

2 毛細(xì)管凝膠電泳（Capillary Gel Electrophoresis，CGE）

分離原理：凝膠電泳是凝膠移到毛細(xì)管中用為支撐物進行分離的區(qū)帶電泳。凝膠是一種固態(tài)的分散的體系。具有多孔性，類似于分子篩的作用，被分離物在通過裝入毛細(xì)管內(nèi)的凝膠力，按照各自分子的體積大小逐一分離，分子體積大的首先被分離出來，適用于生物大分子的分析，可純粹按分子體種大小進行分離（SDS-PAGE），以決定蛋白質(zhì)的分子量，可以識別一個堿基差異的寡核苷酸，可分離DNA片段，如微衛(wèi)星（STR）分析，可改變凝膠的濃度不控制分離的范圍，如PCR產(chǎn)物的分析。

3  膠束電動毛細(xì)管色譜（Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography，MECC）

分離原理：是電泳技術(shù)和色譜技術(shù)的交叉，當(dāng)把離子型表面活性劑加入緩沖液中，并且其濃度足夠大時，這種表面活性劑的單體就結(jié)合在一起，形成球體（膠束）。目前以十二烷基磺酸鈉（SDS）膠束用的最為普遍，MECC存在二個相之間分配，由于它們在膠束中具有保留能力而產(chǎn)生不同的保留時間，和CZE一增，緩沖液在管壁處形成正電，產(chǎn)生強烈的向負(fù)極方向移動的最滲流，面SDS膠束由于外殼帶負(fù)電性，具有向正極遷移的傾向，一般電滲流的速度＞膠束向正極遷移速度，迫使膠束最終以較低的速度向負(fù)極移動。中性粒子之間的分離是根據(jù)其本身的疏水性的不同而達到的，不同疏水性的粒子和膠束的相互作用不同。疏水性強的作用力大，保留的時間長。

MECC是目前惟一既能分離中性離子又能分離帶電組分的HPCE模式。

4 等電聚焦電泳（Isoelectric Focusing，IEF）

分離原理：兩性電解質(zhì)在分離介質(zhì)中的遷移，在毛細(xì)管內(nèi)形成pH梯度，各種具有不同等電點的多肽和蛋白質(zhì)按照這一梯度遷移到其不同的等電位置并停下，由此產(chǎn)生一條非常窄的聚焦區(qū)帶，利用等電點的細(xì)微差異進行分離，將不同的蛋白質(zhì)聚焦在不同的位置上后，陰極的緩沖液換成鹽類，再加上高壓，使末端引起梯度降低，讓組分一個個通過檢測器可求得精確的等電點。

5 等速聚焦電泳（Isotachophoresis，ITP）

分離原理：在被分離組分與電解質(zhì)一起向前移動的同時進行聚焦分離的電泳方法，與IEF一樣，ITP在毛細(xì)管中的電滲流為零，緩沖系統(tǒng)由前后兩種不同淌度的電解質(zhì)組成，分離時毛細(xì)管內(nèi)首先導(dǎo)入尾隨電解質(zhì)（淌度低于被分離組分）。在強電場的作用下，各被分離組分在兩種電解質(zhì)之間的空隙是發(fā)生聚焦分離。

選擇處理或未處理硅交毛細(xì)管均右，電滲流可用0.25%羥脯氨酰甲本纖維抑制.前導(dǎo)電解質(zhì):5nM磷酸,尾隨電解質(zhì):纈氨酸,在分離開始時,電流會由于高淌度的電解質(zhì)完全充滿毛細(xì)管而迅速增大,進入分離過程時,電流會隨著低淌度的電解質(zhì)進入毛細(xì)管而下降.

6 毛細(xì)管電色譜(capillary electrochromatography,CEC)

分離原理:是將高效液相色譜眾多的固定相填沖到毛細(xì)管中,以樣品與固定相間的相互作用為分離機制,以電流流相為驅(qū)動力的色譜過程.

7 親和毛細(xì)管電泳(affinity capillary electrkphoresis,ACE)

分離原理:在電泳過程中具有生物專一性親和力,即受體(recepror)和配體(ligand)相互間發(fā)生的特異親和作用.形成了受體的配體的復(fù)合物.對受體和配體在發(fā)生親和作用前后的電泳圖譜變化,可獲得有關(guān)受體和配體親和力大小結(jié)構(gòu)變化作用產(chǎn)物等方面的信息.

8 電動色譜(electrokinetic chromatography,EKC)

分離原理:是根據(jù)電動現(xiàn)象命名的一種電泳模式,涉及電滲,電泳和色譜三方面的原理,主要用于手性化合物的分離.

9 非水相毛細(xì)管電泳(non-aqueous capillary electrphoresis,NACE)

分離原理:是分析物在有機溶劑中進行電泳分離的一種模式,使用非水相介質(zhì)可增加方法的選擇性,并有利于非水溶性物質(zhì)的分離.