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微流控電阻抗技術(shù)檢測蜜蜂孢子

瀏覽次數(shù):4761 發(fā)布日期:2018-11-20  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
倘若地球上的蜜蜂消失了,人類或要消失?這句話不是小編說的,是下圖這個(gè)老頭兒說的。小編也絕沒有要危言聳聽的意思。
 

這個(gè)老頭兒在他的絕密手記上是這么說的:人類有可能在2060年滅絕;倘若地球上的蜜蜂全部消失了,人類或許也要消失了,甚至有可能只剩下不到4年的時(shí)間。


好吧,說什么我都不相信他說的2060年人類就滅絕的事情。不過認(rèn)真地說,如果沒有蜜蜂授粉,地球上的萬物應(yīng)該都會受到影響吧。難道要靠蒼蠅么?
 

內(nèi)生孢子又稱芽孢,主要來源于寄生在昆蟲的消化道上皮細(xì)胞中的微孢子蟲,典型的有蜜蜂腸道微孢子蟲和家蠶微孢子蟲。微孢子蟲病感染傳播速度快,易出現(xiàn)群體體質(zhì)衰弱甚至死亡,因此需要對昆蟲腸道中的內(nèi)生孢子進(jìn)行檢測,以達(dá)到對微孢子蟲病的防控和判斷最佳治療期。

目前,實(shí)驗(yàn)室對于蜜蜂腸道內(nèi)生孢子的計(jì)數(shù)只能通過顯微鏡計(jì)數(shù),其過程費(fèi)時(shí)費(fèi)力,且蜜蜂腸道內(nèi)生孢子粒徑較小,僅2~3μm,不同人員間鏡檢結(jié)果偏差較大,且濃度偏高時(shí)鏡檢尤其困難。卓微科技定制版JIMBIO CL 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可替代顯微鏡鏡檢,檢測濃度范圍為1e5~5e6,能夠提高計(jì)數(shù)效率,給出準(zhǔn)確客觀的計(jì)數(shù)結(jié)果。


下面是整個(gè)蜜蜂腸道內(nèi)生孢子的計(jì)數(shù)案例

材料:
感染微孢子蟲病蜜蜂 、PBS(1X)

孢子懸液純化制備:
1、取蜜蜂的腹部,置于放入蒸餾水及研磨粉的研缽中研磨。
2、研磨均勻后轉(zhuǎn)入10ml離心管中,500rpm低速離心3min。
3、上清轉(zhuǎn)入新的10ml離心管,棄沉淀,2000rpm高速離心10min。
4、棄上清,用清水重新懸浮沉淀,4000rpm離心10min。
5、取沉淀,用1mlPBS溶解沉淀,4℃保存?zhèn)溆谩?br />
顯微鏡鏡檢圖:
 




結(jié)果與分析:
 


從圖1、圖2可以看出,蜜蜂腸道內(nèi)生孢子比較小,且濃度較高的時(shí)候,樣本平鋪在血球計(jì)數(shù)板上非常密集,顯微鏡下計(jì)數(shù)困難。

從表1中可以看出,定制版JIMBIO-CL測試結(jié)果與計(jì)數(shù)板統(tǒng)計(jì)相比,平均濃度基本一致,由于定制版JIMBIO-CL為10微升樣本全計(jì)數(shù),測試結(jié)果波動(dòng)較小,穩(wěn)定性明顯優(yōu)于進(jìn)口血球計(jì)數(shù)板。

注意事項(xiàng):
1、只能使用PBS(1X)稀釋待測蜜蜂孢子樣本;
2、加樣前需充分混勻待測樣本(可根據(jù)樣本總量選擇不同規(guī)格液槍吹打);
3、為保證檢測結(jié)果的穩(wěn)定性,待檢測樣本總量不要低于100微升。

致謝:
感謝福建農(nóng)林大學(xué)蜂學(xué)院郭睿老師課題組和黃偉峰老師課題組提供樣本,并共同完成應(yīng)用開發(fā)。

歡迎研究蠶寶寶的課題組給我們致電,一起研究蠶寶寶的內(nèi)生孢子。
 
來源:江蘇卓微生物科技有限公司
聯(lián)系電話:400-993-9893
E-mail:yt.dong@jim-bio.com

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