Nature子刊：科學(xué)家利用熒光光鑷系統(tǒng)對(duì)Cas9脫靶效應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)可視化評(píng)估

Nature子刊：科學(xué)家利用熒光光鑷系統(tǒng)對(duì)Cas9脫靶效應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)可視化評(píng)估
 

    CRISPR-Cas9作為一種有效的基因編輯方法，在疾病預(yù)防與治療中具有巨大的潛能，但是在臨床轉(zhuǎn)化中必須要考慮到它的脫靶效應(yīng)。傳統(tǒng)的生物學(xué)手段如電泳或測(cè)序等，雖然也可以用來(lái)研究Cas9的靶向性，但是其結(jié)果大多數(shù)為靜態(tài)的、平均的。2019年3月發(fā)表在Nature Structural and Molecular Biology期刊上的最新文章 ，采用最新的熒光光鑷技術(shù)，利用光鑷操縱DNA模板，結(jié)合共聚焦熒光顯微成像系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)了在單分子水平動(dòng)態(tài)的觀察Cas9對(duì)目的基因的靶向編輯。

    結(jié)果表明，當(dāng)DNA松弛時(shí)，CRISPR的編輯具有特異性，但是當(dāng)DNA被拉伸時(shí)，CRISPR編輯準(zhǔn)確性降低，并出現(xiàn)脫靶編輯，其脫靶的概率隨著受力的增加而增加。這項(xiàng)研究將有助于設(shè)計(jì)具有更高準(zhǔn)確度的CRISPR系統(tǒng)。

Hold the molecule & Look at it！
    深入了解單分子的相互作用有助于科學(xué)家更好地回答最基本的生命科學(xué)問(wèn)題。如何在單分子水平開(kāi)展生物分子的動(dòng)態(tài)研究也是單分子生物物理領(lǐng)域的一個(gè)難題。原子力顯微鏡、光鑷等單分子操縱技術(shù)的出現(xiàn)使得這種研究成為了可能。荷蘭LUMICKS公司研發(fā)的C-Trap熒光光鑷系統(tǒng)采用雙光鑷+熒光共聚焦成像技術(shù)，是研究單分子互作的有力工具！