CEM 公司Discover® 2.0在氨基酸水解中的應(yīng)用

               
                                           

氨基酸分析用于定量各種樣品中的一組基本的營(yíng)養(yǎng)素。 為了為所有氨基酸的定量提供可靠、可重現(xiàn)和準(zhǔn)確的方法，必須同時(shí)考慮樣品處理和色譜分離。 在樣品處理中，樣品必須被水解，以便可以測(cè)量氨基酸的比例。 可以使用多種水解方案，因?yàn)椴⒎撬�有氨基酸都同樣穩(wěn)定。每個(gè)樣品必須經(jīng)過三種不同的水解方案，即用于確定總蛋白質(zhì)組成的酸水解、用于測(cè)量含硫氨基酸的過甲酸氧化后的酸水解以及用于評(píng)估色氨酸回收率的堿水解 。這些水解技術(shù)可能非常耗時(shí)，完成一個(gè)樣品需要長(zhǎng)達(dá) 24 小時(shí)，并且可能還需要特殊設(shè)備。
使用美國(guó)CEM公司Discover微波氨基酸水解儀器，可以大大改善對(duì)水解條件的控制，并具有更好的準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性、速度和穩(wěn)健性。
                                                 
         圖 1. CEM Discover 2.0 Microwave Reaction System with Explorer Autosampler 

CEM Discover 2.0（圖 1）使用專利環(huán)形單模微波技術(shù)水解蛋白質(zhì)和多肽，為氨基酸分析做準(zhǔn)備，最快 15 分鐘完成。

                                              

1. 內(nèi)置革命性的，專利的iWave 溫度傳感器，可提供樣品本身的準(zhǔn)確溫度讀數(shù)。
2. 自動(dòng)耦合微波腔，微波能量分布自動(dòng)調(diào)整，微波能量可以快速加熱和維持每個(gè)樣品的設(shè)定溫度；
3. 優(yōu)越的風(fēng)機(jī)系統(tǒng)的性能，完全可調(diào)的在線攪拌，均勻的熱量分布；
4. 使用簡(jiǎn)單的軟件操作系統(tǒng)；
5.  集成500萬像素的攝像頭；
6. 全自動(dòng)反應(yīng)操作，自動(dòng)采樣器有12個(gè)和48個(gè)位置模塊，提供完全自動(dòng)化的反應(yīng)處理能力；

                                    

                                               圖 2. CEM Discover 2.0

如圖3 所示，樣品溫度由獲得專利的測(cè)量， 原位攪拌確保熱量均勻分布在樣品中，反應(yīng)后可在幾秒鐘內(nèi)冷卻樣品，以便為進(jìn)一步處理或分析做好準(zhǔn)備。
          

                              

圖3. Process of Microwave Hydrolysis in CEM Discover 2.0

                                             
 

• 稱量300-500 mg樣品到 35 mL 小瓶中。
• 加入 10 mL 6N HCl。
• 蓋上瓶蓋。
• 使用動(dòng)態(tài)方法控制，設(shè)定 0-300 W功率、15 分鐘保持時(shí)間、160 °C目標(biāo)溫度 和 300 psi 目標(biāo)壓力條件，攪拌應(yīng)設(shè)置為中速。
• 將樣品瓶放入 Discover微波腔并按 Start 鍵開始方法。

                                           

建議使用上述程序中概述的正確樣品量、體積和容器。 樣品的某些成分在水解后會(huì)保留在固相中，并且在此過程中通常會(huì)變黑，如圖 4 所示。這種情況是正常的，氨基酸會(huì)在溶液中。