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Morris水迷宮實驗中容易出問題的環(huán)節(jié)

瀏覽次數(shù)：1014　發(fā)布日期：2022-4-28　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

Morris水迷宮實驗結果受到很多因素影響，今天特別寫篇文章作一個總結，供大家參考：

1、動物品系

不同的小鼠品系在 MWM 測試期間的性能差異很大。

大鼠：盡管眼睛色素沉著減少，但白化菌株（如 Sprague-Dawley、Wistar、Fischer 344 和 Lewis）學習良好，色素菌株（如 Long-Evans 和 Listar）也是如此。
小鼠：許多實驗室報告說，C57BL 小鼠在 MWM 測試中表現(xiàn)最好，C57BL 小鼠是相當優(yōu)秀的游泳者，對被放置在水中時會做出適當?shù)挠斡舅阉鞣磻?/li>

2、設備裝置

很多市售的Morris水迷宮尺寸不規(guī)范，材質比較老套，比如還有很多廠家在使用不銹鋼材質，不銹鋼焊接而成的水迷宮水池通常具有突出的焊縫、波紋表面或其他提供近端提示的特征，這樣的線索破壞了水迷宮測試的目標，因為實驗目的就是測試動物使用遠端線索導航的能力。光滑的內(nèi)墻、溫和的材質感還可以最大限度地減少動物在早期試驗中爬墻的嘗試。

莫里斯本人最初的迷宮直徑為 130 厘米，但后來他引入了一個更大的直徑為 214 厘米的迷宮。此后，他又提到了一個 200 厘米直徑的迷宮。在這里，我們將描述兩種裝置：一種用于大鼠，一種用于小鼠。構成評估空間學習的最佳任務的下限規(guī)格，目前比較主流和規(guī)范的水迷宮水池直徑（內(nèi)徑），應當保持大鼠在160cm以上，小鼠在120cm以上。值得注意的是，很多廠家生產(chǎn)的大鼠水迷宮水池大鼠的直徑只有150cm，其實對大鼠水迷宮實驗有深刻的影響。

最常見的問題是使用不合適的水池與平臺尺寸組合。許多水池偏小或處于構成評估空間學習的最佳任務的下限。較小的水箱允許動物使用其他策略（例如從墻壁游泳固定距離）來解決任務，同時盡量減少遠端線索的使用。不幸的是，如果水池太小，動物會學習，實驗者不會意識到動物正在使用非遠端線索來尋找平臺，并且不會出現(xiàn)任何問題。最終，實驗結果統(tǒng)計時就會發(fā)現(xiàn)實驗差異不明顯，實驗動物雖然學得很快，但幾乎沒有學習曲線，失去實驗意義。因此，從一開始就選擇合適的水箱尺寸是獲得有效空間學習的最佳方法。

3、逃生站臺、平臺

平臺可以是方形或圓形，直徑通常為 10 或 11 cm或 10-12 cm，通常浸沒在表面以下 1-2 cm，對于小鼠來說，這個深度通常會減小到0.5-1 厘米。需要注意的是，在某些學習階段使用較小的平臺尺寸來增加任務難度是有益的。任務難度是搜索區(qū)域與目標大小之比的一個“函數(shù)”。

平臺通常由丙烯酸或 PVC 制成，底座通常是一塊較大的丙烯酸樹脂，位于水池的底部，并且足夠大以提供穩(wěn)定性，這樣當動物爬上它時它就不會傾斜，當動物撞到它時它會抵抗運動。

4、水溫

另一個常見的問題是水溫。最初建議大鼠需要比大多數(shù)實驗室發(fā)現(xiàn)的典型環(huán)境空氣溫度（19-22°C）更溫暖的水，但這尚未得到廣泛證實。在已平衡至 19–22 °C 環(huán)境溫度的水中進行測試的大鼠表現(xiàn)良好，并且在典型測試年齡時沒有顯示出明顯疲勞或體溫過低的跡象。然而，小鼠的情況可能會有所不同。

5、房間配置

Morris水迷宮應放置在具有充足周圍視覺線索的房間中，同時在測試期間不要移動這些提示線索。線索與迷宮外墻的距離也很重要，一些實驗室相對雜亂，在迷宮周圍安裝窗簾很有用。窗簾不需要完全閉光。

6、燈光

房間照明應該是間接的，不要直射，特別是如果使用攝像機、計算機和跟蹤軟件來記錄性能。跟蹤軟件對水面的光反射很敏感，這些反射通過間接照明被最小化。

7、實驗員

實驗者可以： (a) 在測試期間離開房間；(b) 站在視覺障礙后面；(c) 在固定位置保持靜止。后者是最常見的，但不應忘記實驗者隨后成為遠端線索之一。在不同象限中進行測試的動物，尤其是在迷宮的遠端和近端一半，有時會顯示出不同的潛伏期，這取決于它們是游向還是遠離實驗者。不應讓實驗者在等待動物執(zhí)行任務時四處走動而混淆結果。

8、跟蹤系統(tǒng)

有許多商業(yè)供應商提供可用于 MWM 的跟蹤系統(tǒng)。非詳盡列表包括上海欣軟VisuTrack、HVS Image、Accuscan、Columbus Instruments、Watermaze Software等。與任何軟件系統(tǒng)一樣，在選擇之前應進行現(xiàn)場測試。

9、測試順序、測試次數(shù)

水迷宮實驗測試次數(shù)通常為每天4次，幾乎沒有證據(jù)表明每天的試驗次數(shù)會產(chǎn)生較大的敏感性差異。

測試順序有2種，也是經(jīng)常有老師咨詢我們的。第一種方法就是每只老鼠先完成當天的4次測試，再開始下一只老鼠的測試；另一種方法就是讓一只動物一個trai結束，在平臺上停留 15 秒，然后將其移至籠子并直接開始測試第二只動物并重復此輪換，直到所有動物完成試驗trial 1，然后重復該過程以進行后續(xù)試驗，trial2、trial3及trail4。后一種方法提高了小鼠的學習能力，但并沒有可比的數(shù)據(jù)用于大鼠。

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