正確凍存細(xì)胞--使細(xì)胞不易被污染

隨著實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展，除了原代培養(yǎng)之外，還將建立開發(fā)或獲得眾多的細(xì)胞系。每一個(gè)細(xì)胞系均擴(kuò)大了其起源細(xì)胞的應(yīng)用，成為有價(jià)值的資源。若該細(xì)胞系頗為獨(dú)特，則其可能是不可替換的；替換至少也是昂貴與耗時(shí)的。因此，必須通過保存細(xì)胞系來保證這種重要投資。

由于培養(yǎng)早期傳代培養(yǎng)的選擇，有限細(xì)胞系的衰老以及連續(xù)細(xì)胞系的遺傳和表現(xiàn)不穩(wěn)定性，使細(xì)胞系在連續(xù)培養(yǎng)時(shí)有變異傾向。

此外，即使在管理最好的實(shí)驗(yàn)室中也有可能發(fā)生儀器故障和污染。交叉污染以及錯(cuò)誤辨識(shí)的發(fā)生率也很高。因此，存在諸多理由進(jìn)行冷凍儲(chǔ)存細(xì)胞，總體概述有10大不得不凍存細(xì)胞的理由：

①由于遺傳不穩(wěn)定性而導(dǎo)致基因漂移；
②衰老，最后導(dǎo)致細(xì)胞系消失；
③生長(zhǎng)特性的轉(zhuǎn)化以及惡性相關(guān)特性的獲得；
④由于選擇和去分化導(dǎo)致表型的不穩(wěn)定性；
⑤微生物污染；
⑥其他細(xì)胞系的交叉污染；
⑦由于操作粗心而導(dǎo)致的錯(cuò)誤鑒別；
⑧孵育箱故障；
⑨對(duì)于保存那些不立即使用的細(xì)胞系，可節(jié)省時(shí)間和材料；
⑩需要將細(xì)胞系轉(zhuǎn)給其他使用者。

在考慮凍存細(xì)胞之前，需滿足以下特定條件：

01
確認(rèn)凍存前需證實(shí)細(xì)胞系未受污染，且確為該細(xì)胞系。盡管對(duì)于新獲得的細(xì)胞系，可以在完全確認(rèn)前凍存幾支，但在大量?jī)龃媲皯?yīng)進(jìn)行徹底確認(rèn)。

02
凍存時(shí)間，如果是有限細(xì)胞系，這些細(xì)胞應(yīng)經(jīng)5代倍增生長(zhǎng)，獲得足夠量的細(xì)胞再進(jìn)行凍存。連續(xù)細(xì)胞系應(yīng)將其克隆化，選擇特征性的克隆，待生長(zhǎng)至足夠數(shù)量再進(jìn)行凍存。連續(xù)細(xì)胞系有其優(yōu)勢(shì)：它們可無限生長(zhǎng)，生長(zhǎng)比較迅速，容易克隆，但是它們?nèi)狈�遺傳穩(wěn)定性。有限細(xì)胞系通常或接近二倍體。在一定傳代水平間是穩(wěn)定的，但是，它們很難克隆，生長(zhǎng)緩慢，最終死亡或發(fā)生轉(zhuǎn)化。

推薦產(chǎn)品

【SNL-018】人胚肺細(xì)胞
【SNS-002】特級(jí)胎牛血清
【SNM-002D】DMEM高糖（含丙酮酸鈉、谷氨酰胺，含雙抗）


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公司主要研發(fā)生產(chǎn)細(xì)胞系、原代細(xì)胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品，提供細(xì)胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購(gòu)；細(xì)胞庫(kù)凍存細(xì)胞系500余種，同時(shí)通過不間斷引種細(xì)胞擴(kuò)大豐富細(xì)胞種類；公司還提供人源細(xì)胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等。

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