玉米粉中黃曲霉毒素檢測的高通量固相萃取方法

黃曲霉毒素(aflatoxins)是一種由黃曲霉和寄生曲霉等真菌經(jīng)過聚酮途徑產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)通常包含一個雙呋喃環(huán)和一個氧雜萘鄰酮，天然產(chǎn)生的黃曲霉毒素根據(jù)其化學結(jié)構(gòu)不同分為B1、B2、G1、G2四種。

 

食品遭受產(chǎn)毒真菌以及霉菌毒素污染的問題在世界范圍內(nèi)反復發(fā)生，被污染的農(nóng)作物作為飼料資源被畜禽食用后， 攜帶的霉菌毒素又可在肉、蛋、奶等食品中蓄積，通過食物鏈傳遞， 危害人類健康。

逗點生物Copure® 226多功能凈化板
 

逗點生物采用24孔Copure® 226多功能凈化板，實現(xiàn)了黃曲霉毒素的快速、高通量檢測。建立玉米粉中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2檢測的LC-MS/MS檢測方法。兩個水平（0.5.ng/g，1.0 ng/g）的加標回收率均在90-110 %之間，孔間回收率CV值小于5 %。

 

本方法操作簡便快捷，具有回收率高和除雜效果好的優(yōu)勢，能夠作為 玉米粉中黃曲霉毒素檢測的參考方法。

 

本方法適用于谷物及其制品、豆類及其制品、堅果及籽類、油脂及其制品、調(diào)味品、嬰幼兒配方食品和嬰幼兒輔助食品中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的測定。

參照 《GB 5009.22-2016  食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定》。


一、樣品前處理


 

biocomma®多管旋渦混勻儀

1.1樣本提取

1）稱取 5 g試樣于50 mL離心管中，加入一定量同位素內(nèi)標工作液振蕩混合后靜置30 min。

2）加入20 mL乙腈-水溶液（84+16），渦旋混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20 min，在6000 r/min下離心10 min，取上清液備用。

 

1.2樣本凈化

1）將24孔凈化板放置在24孔收集板上，再向凈化板孔中加入6 mL樣品提取液。

2）將24孔凈化板和收集板放置在24孔正壓提取裝置下，開啟氣閥開關，使凈化板孔和輸氣孔保持對應，匹配良好。

3）調(diào)整氣體輸出壓力，使樣品提取液過濾至收集板中。

4）取4 mL樣品凈化液，40℃下氮氣吹干，用1 mL初始流動相復溶，渦旋 30s 溶解殘渣，過0.22 μm微孔濾膜，上機分析。

▲biocomma®24孔正壓提取裝置▲

二、儀器條件
 

儀器設備：UPLC-MS/MS

Thermo Scientific TSQ Endura

色譜柱：Thermo  C18   

2.1x100 mm， 1.7 um

流動相：A：0.1%甲酸水    B：乙腈

流動相梯度：初始80%A，20%A（0 min~2 min），20%A（2 min~3 min），80%A（3 min~3.1min），80%A（3.1min~5min）

流速：0.3 mL/min

柱溫：室溫

進樣體積：5.0 mL

質(zhì)譜條件

檢測方式：多離子反應檢測（MRM）