無血清凍存液凍存MG63細(xì)胞的使用方法及注意事項(xiàng)

 
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提問
MG63可以用無血清凍存液凍存嗎?
回答
可以使用。不同品牌的凍存液凍存效果可能不一樣，建議凍存后次日復(fù)蘇一管檢測(cè)細(xì)胞活率及狀態(tài)沒有問題后再將剩余凍存細(xì)胞放置液氮中保存。
 
注 意 事 項(xiàng)
不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大，注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)
 
無血清凍存液的使用方法分享：
選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。
1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于離心管中；
2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)；
3.取所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液置于離心管中，900rpm離心3min，棄上清；
4.加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度為1x106至2x106 cells/ml，緩慢地混合均勻，制成細(xì)胞混合液；
5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示細(xì)胞名稱的凍存管中；
6.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，過夜冷凍保存，第二天移至-196℃液氮罐。