熱板測(cè)痛儀的使用方法、實(shí)驗(yàn)流程以及注意事項(xiàng)

 

二、核心特點(diǎn)
（一）工業(yè)設(shè)計(jì)

1. 創(chuàng)新的羽翼化機(jī)身造型，全金屬機(jī)身，符合人體工程學(xué)設(shè)計(jì)；

2. 合理的散熱布局，有效改善設(shè)備內(nèi)部電子元件與機(jī)殼的自然傳熱能力，保證儀器高強(qiáng)度運(yùn)行穩(wěn)定；

3. 精致的程序 UI 設(shè)計(jì)，人性化的人機(jī)交互界面；

（二）熱板表面

1. 全新材料：具有較強(qiáng)的耐磨性，抗腐蝕性；

2. 特殊工藝：具有較高的光潔度、導(dǎo)熱性；

3. 大尺寸熱盤(pán)：可兼容不同體重的老鼠，熱盤(pán)直徑達(dá)到了驚人的 24cm；

（三）溫度控制

1. 核心算法：超級(jí)模糊 PID 控制算法，使溫度控制更加精準(zhǔn)

2. 多實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ剑汉銣貙?shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ健⒕�(xiàn)性加溫實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ�、外控�?shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ剑ㄟx配）

（四）控制方式

1. 單機(jī)模式：腳踏開(kāi)關(guān)控制及觸摸屏按鈕控制

2. 上位機(jī)模式（選配）：配備全新的、用戶(hù)友好的軟件，可以配置實(shí)驗(yàn)和管理結(jié)果數(shù)據(jù)導(dǎo)出方式

（五）數(shù)據(jù)導(dǎo)出方式

1. USB 數(shù)據(jù)導(dǎo)出：直接插入 U 盤(pán)，一鍵快讀導(dǎo)出數(shù)據(jù)

2. 熱敏打印機(jī)打印數(shù)據(jù)：可選配打印機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)打印

三、技術(shù)參數(shù)

1、設(shè)備擁有兩種實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ剑汉銣啬Ｊ郊熬�(xiàn)性加溫模式；

2、采用獨(dú)家開(kāi)發(fā)的超級(jí)模糊 PID 控制算法，可進(jìn)行斜率比例、斜率積分、斜率微分等溫度控制參數(shù)的設(shè)置；

3、系統(tǒng)擁有快速降溫模式；

4、溫度控制精度：0.1℃、溫度顯示精度：0.1℃；

5、時(shí)間顯示精度：0.01s；

6、溫度傳感器：采用進(jìn)口數(shù)字溫度傳感器；

7、溫度設(shè)置范圍：室溫~80℃；

8、顯示方式：觸摸屏；

9、顯示內(nèi)容：實(shí)際溫度、設(shè)定溫度、痛閾時(shí)間、分組信息等；

10、數(shù)據(jù)導(dǎo)出方式：可進(jìn)行 USB 數(shù)據(jù)導(dǎo)出，也可選配熱敏打印機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)打印；

11、控制方式：腳踏開(kāi)關(guān)控制、觸摸開(kāi)關(guān)控制、上位機(jī)軟件控制（選配）；

12、可選配疼痛實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)管理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的詳細(xì)管理；

13、電源電壓：AC110~220V±20V；

14、熱板加熱盤(pán)尺寸不低于 23cm，可同時(shí)滿(mǎn)足不同體重的老鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；

15、儀器自帶動(dòng)物防燙傷參數(shù)設(shè)計(jì)，防止實(shí)驗(yàn)過(guò)程中燙傷老鼠皮膚；

16、選配外控加熱模式，可滿(mǎn)足動(dòng)物溫度相關(guān)課題的研究需要，支持第三方軟件控制溫度；

17、界面語(yǔ)言：中文、英文切換；

四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

疼痛的動(dòng)物模型受到多種調(diào)節(jié)因素的重要影響，包括性別、基因型和社會(huì)交流，在使用動(dòng)物模型時(shí)必須考慮所有這些因素。

在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別上，熱板測(cè)試一定要選擇雌鼠，因?yàn)樾凼笫怯胁G丸的，實(shí)驗(yàn)時(shí)陰囊的皮膚會(huì)不可避免地緊貼于金屬熱板，睪丸對(duì)熱的感受比爪子更敏感，因此產(chǎn)生了混淆效應(yīng)。而且鼠會(huì)異常暴躁，影響實(shí)驗(yàn)。疼痛研究中最常用的動(dòng)物是實(shí)驗(yàn)室大鼠，基本的熱板實(shí)驗(yàn)可以選擇年輕的成年雌性Sprague Dawley大鼠。但是最近將這些疼痛模型應(yīng)用于具有靶向基因突變的小鼠已被證明是一種強(qiáng)大的工具，然而，大鼠和小鼠的行為反應(yīng)可能不同。正如Mogil等人簡(jiǎn)潔地解釋的那樣，“小鼠不是小的大鼠”。如果首次將已建立的大鼠模型應(yīng)用于小鼠，請(qǐng)務(wù)必牢記這一點(diǎn)。

對(duì)于轉(zhuǎn)基因小鼠是否可以作為疼痛模型，雖然充滿(mǎn)了解釋的復(fù)雜性，但是轉(zhuǎn)基因技術(shù)改變了基本的疼痛研究，即使在沒(méi)有選擇性配體或抗體的情況下，也可以研究單個(gè)蛋白質(zhì)在疼痛中的作用。這項(xiàng)技術(shù)也意味著許多實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)從使用大鼠轉(zhuǎn)向使用小鼠了。這種轉(zhuǎn)變并非沒(méi)有代價(jià)：在許多實(shí)際方面，小鼠作為疼痛實(shí)驗(yàn)對(duì)象不如大鼠。但廣泛使用轉(zhuǎn)基因小鼠的一個(gè)幸運(yùn)結(jié)果是越來(lái)越關(guān)注遺傳背景對(duì)疼痛敏感性的影響。

五、測(cè)試流程

1、實(shí)驗(yàn)材料

1)最佳年齡的小鼠或大鼠（一般是6至8周）。

2)測(cè)試藥物和溶劑對(duì)照。

3)熱板裝置（可配備表面溫度計(jì)，用于校準(zhǔn)和維護(hù)設(shè)備）。

2、適應(yīng)

1)將動(dòng)物從飼養(yǎng)室轉(zhuǎn)移到實(shí)驗(yàn)室，稱(chēng)重并記錄，讓動(dòng)物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境至少半小時(shí)。

2)設(shè)置金屬板溫度與測(cè)試室的溫度匹配并清潔測(cè)試板表面。

3)將單個(gè)受試者動(dòng)物放入測(cè)試小室中，不受干擾地探索15分鐘。

4)取出動(dòng)物并清潔板表面的任何尿液或糞便。

3、測(cè)試

1)將熱板溫度設(shè)置為測(cè)試溫度，范圍通常在 50 °C～56 °C之間。

2)一旦達(dá)到預(yù)設(shè)溫度，將適應(yīng)好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放在熱板上。

3)測(cè)量第一次出現(xiàn)傷害反應(yīng)（例如，舔足，后爪抬起或跳躍）的潛伏期。設(shè)置終止時(shí)間，例如給藥后，動(dòng)物沒(méi)有明顯的傷害感受反應(yīng)，則必須在提前規(guī)定的終止時(shí)間后將動(dòng)物從熱板上移開(kāi)，以免對(duì)動(dòng)物造成組織損傷。

4)出于倫理原因，出現(xiàn)傷害反應(yīng)后應(yīng)快速將動(dòng)物從測(cè)試表面上移開(kāi)，以避免不必要的痛苦和/或組織損傷。

5)將測(cè)試過(guò)的動(dòng)物放入與未測(cè)試的動(dòng)物分開(kāi)的籠子中。大/小鼠可以通過(guò)各種嗅覺(jué)和超聲波系統(tǒng)進(jìn)行交流，這可能是焦慮和恐懼的來(lái)源。

6)將測(cè)試板溫度恢復(fù)到室溫，并清潔金屬板的表面。

4、測(cè)試多種溫度

如果在多個(gè)溫度下測(cè)試相同的小鼠，則應(yīng)將測(cè)試分開(kāi)至少24小時(shí)，以避免壓力和重復(fù)測(cè)試對(duì)潛伏期時(shí)間的影響。

六、注意事項(xiàng)
 

1.可以預(yù)選30 s內(nèi)有疼痛反應(yīng)的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，將逃避、跳躍等不安定的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物剔除。

2.實(shí)驗(yàn)前一定要讓動(dòng)物適應(yīng)環(huán)境和裝置，暴露于新環(huán)境可能會(huì)掩蓋或改變潛伏期數(shù)據(jù)。

3.每只動(dòng)物測(cè)試結(jié)束后一定要清潔金屬板，因?yàn)楹笞ι系哪蛞夯蚣S便可能會(huì)改變測(cè)試板的傳熱特性，同時(shí)避免上一只動(dòng)物的氣味對(duì)下一只測(cè)試動(dòng)物的影響。

4.傷害性反應(yīng)包括前爪縮回或舔舐，但不建議使用前爪的反應(yīng)作為觀(guān)察指標(biāo)，因?yàn)榍白νǔ�參與梳理和探索行為，并且與金屬表面的接觸不一致。后爪縮回或舔舐被認(rèn)為是傷害感受的更可靠指標(biāo)。不過(guò)，簡(jiǎn)單的后爪抬起也可能是由于梳理和探索。

5.不建議短時(shí)間內(nèi)重復(fù)測(cè)試。在有害甚至無(wú)害的溫度下反復(fù)暴露于熱板測(cè)試可能降低行為反應(yīng)的潛伏期。

在未加熱時(shí)對(duì)小鼠的“正常”行為進(jìn)行觀(guān)測(cè)是必要的，以便可以注意到傷害性測(cè)試期間行為的任何差異。同樣重要的是要注意是否有任何其他因素可能影響疼痛行為，例如梳理、睡覺(jué)、排便或因噪音或光線(xiàn)水平的變化而分散注意力。