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磁珠法提取試劑盒使用常見(jiàn)誤區(qū)匯總

瀏覽次數(shù):651 發(fā)布日期:2023-8-8  來(lái)源:蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
隨著磁珠法在核酸提取中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛,很多人對(duì)于磁珠提取的理解和實(shí)踐也存在一定的誤區(qū)。本文將針對(duì)常見(jiàn)的磁珠法提取試劑盒使用誤區(qū)進(jìn)行探討,希望能夠幫助讀者正確理解和使用磁珠法進(jìn)行核酸提取。

1.誤區(qū)1:磁珠越多,提取效果越好
  有一些人認(rèn)為在提取效果不佳時(shí),增加磁珠的用量可以吸附更多的核酸,但事實(shí)上這種想法是不可取的。磁珠的使用量應(yīng)該在一定范圍內(nèi),過(guò)多的磁珠不能均勻分散在液體中,導(dǎo)致無(wú)法充分增加核酸磁珠和液體接觸的效率,并且過(guò)多的磁珠還會(huì)吸附更多的雜質(zhì),影響除雜效果。因此,我們需要根據(jù)實(shí)際情況控制磁珠的使用量,而不是簡(jiǎn)單地增加磁珠的用量。
2.誤區(qū)2:試劑使用的越多,提取效果越好
   有些人在遇到裂解效果不好或洗滌效果不好的情況時(shí),往往會(huì)采取增加裂解液或洗滌液的方式來(lái)提高提取效果。然而,對(duì)于磁珠法而言,增加試劑的使用量會(huì)降低磁珠對(duì)核酸的吸附率,因此單純?cè)黾釉噭┦褂昧坎⒉荒芡耆行У馗纳铺崛⌒Ч。我們需要認(rèn)識(shí)到磁珠法提取的核心在于磁珠吸附核酸的效率,而不是試劑的使用量。因此,在使用磁珠法提取試劑盒進(jìn)行核酸提取時(shí),應(yīng)根據(jù)實(shí)際需要控制試劑的使用量,以保證提取效果的較優(yōu)化。
3.誤區(qū)3:洗滌次數(shù)越多,提取效果越好
在提取到的核酸雜質(zhì)較多時(shí),有些人會(huì)選擇多次洗滌來(lái)提高核酸的純度。然而,多次洗滌會(huì)導(dǎo)致一定量的核酸損失,并增加核酸斷裂水解的可能性。因此,為了保證核酸純度的同時(shí)盡量減少核酸損失,通常將洗滌次數(shù)控制在2~4次為宜。
4.誤區(qū)4:樣本取用的越多,提取效果越好
    一些人會(huì)在核酸提取效果不佳的情況下,采用增加樣本取樣量的方式來(lái)提高核酸提取量。然而,簡(jiǎn)單增加樣本取樣量可能引入過(guò)多的雜質(zhì),超出裂解液的裂解能力,導(dǎo)致提取效率的降低。因此,我們不推薦通過(guò)簡(jiǎn)單增加樣本取樣量來(lái)增加核酸提取量的方式。如果確實(shí)由于樣本量不足導(dǎo)致提取量較低,我們建議在前處理中先進(jìn)行富集或濃縮,或增加裂解的完全性,以提高核酸的暴露度。
5.誤區(qū)5:某一種磁珠好,就應(yīng)該在所有試驗(yàn)中效果都好
   不同種類的磁珠具有不同的特性和適用范圍,不能僅憑某一種磁珠在某一試驗(yàn)中的好效果就認(rèn)為在所有試驗(yàn)中都有效。我們需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體要求選擇合適的磁珠,并且在使用不同的磁珠時(shí),需要進(jìn)行一定的配合調(diào)整,以獲得更好的提取效果。
6.和某種試劑盒對(duì)比效果不好,就是磁珠不好
   某些情況下,當(dāng)和某種試劑盒對(duì)比效果不好時(shí),很容易得出磁珠不好的結(jié)論。然而,不同的磁珠適應(yīng)的體系和用量是不同的,有時(shí)需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整才能獲得更好的提取效果。因此,在篩選磁珠時(shí),我們需要在已有的試劑盒體系下進(jìn)行實(shí)際調(diào)整,以達(dá)到更好的核酸提取效果。
    在磁珠法核酸提取過(guò)程中,我們需理性對(duì)待常見(jiàn)的誤區(qū),根據(jù)實(shí)際情況合理選擇磁珠的使用量和試劑的使用量,并結(jié)合洗滌次數(shù)、樣本取用量等因素,靈活調(diào)整提取條件,以獲得更好的核酸提取效果。同時(shí),我們也需要充分了解不同磁珠的特性和適用范圍,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中進(jìn)行合理的配合調(diào)整,以達(dá)到較佳提取效果。
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