移液器使用中導(dǎo)致誤差的常見問題分析
瀏覽次數(shù):1310 發(fā)布日期:2024-3-28
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《“移液不準(zhǔn)”那些事之一》
移液不準(zhǔn),在實(shí)驗(yàn)中,是操作者最擔(dān)心的事。我從移液器制造者的角度,撰文分享,希望有益。
判別移液準(zhǔn)不準(zhǔn),一般需要鑒別測值偏大還是偏小,或者說檢測是正差還是負(fù)差。
判定方法,通常是兩種,一是質(zhì)量法:移取純水,用電子天平稱量;二是比較法:用相同的純水和相同的吸頭,觀察吸頭內(nèi)液面位置,與以往情況相比較。
一、移液量偏大
一般有兩種原因。
一是操作失誤。一般是二檔吸液了,或者在一檔與二檔臨界區(qū)域吸液了;
二是移液器量程變位了。這是說移液器不準(zhǔn)的情形之一。這種情況,需要校準(zhǔn)移液器,建議由專業(yè)人員處理。
二、移液量偏小
引起移液量偏小的原因很多。最簡單的排查方法和步驟如下。
(1)
排查吸頭和吸液桿。檢查吸頭安裝是否到位,吸頭本身有沒有塑性變形;也可以換裝不同批次不同廠家的吸頭;再有,檢查吸頭與吸液桿配合部位,排除劃痕和磨損。長期使用,吸液桿會產(chǎn)生磨損,個別吸液桿會對不同的極性溶劑,產(chǎn)生腐蝕。這種情況,應(yīng)該找專業(yè)人員更換吸液桿。不建議,非專業(yè)人員,拆卸20μL以下的活塞,更換吸液桿。
(2)
排查活塞氣密性。100μL以上的移液器,可以肉眼觀察,檢查氣密性。即:移液器吸液后,離開液面,懸空滯留5秒鐘以上,觀察吸頭尖端是否形成懸掛的水滴,或者是水滴連續(xù)滴落。100μL以下的移液器,由于大氣壓和吸頭毛細(xì)效應(yīng),肉眼無法判斷,需要移液器吸液后,不離開液面,靜持15秒鐘,觀察吸頭內(nèi)液面狀態(tài),如果液面下降,則是漏液。
特別說明,移液器吸液后靜握在空中,如果吸頭尖端毛細(xì)管內(nèi),氣柱托高液面,這種現(xiàn)象證明,該移液器的密封結(jié)構(gòu),真空度特別高,該移液器活塞機(jī)構(gòu)可靠。
(3)
排查活塞組件污染。第二步驟發(fā)現(xiàn)的漏液,需要拆開移液器活塞。檢查活塞是否污染,檢查密封膠圈和密封襯圈是否有效。實(shí)驗(yàn)中,造成這種故障的原因較多。如,液體竄入、倒流、試劑揮發(fā)氣相變固相、異物等等。
活塞清潔、保養(yǎng)后,需要專用潤滑脂涂抹;密封膠圈和密封墊圈,一般屬于易損件,污染后,需要更新。建議專業(yè)人員處理。
編者:郭三葆 (本文作者感謝“不專業(yè)的傻鳥”)