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昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)介紹

瀏覽次數(shù):833 發(fā)布日期:2024-3-28  來源:卡梅德生物
         昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng),是一種廣泛用于昆蟲桿狀病毒蛋白表達的系統(tǒng),涉及使用桿狀病毒,這是一種昆蟲特異性病毒,在昆蟲細胞中傳遞和表達外源基因。以下是昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)的一些特征:
        
1.桿狀病毒作為載體:桿狀病毒具有有效感染昆蟲細胞并將外源基因引入其基因組的能力。這些病毒可以被改造成攜帶和表達感興趣的基因,使其成為昆蟲桿狀病毒蛋白表達的有用載體。
        
2.昆蟲細胞系:昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)主要利用來源于秋粘蟲(草地貪夜蛾)或卷心菜環(huán)蛾(Trichoplusia ni)的昆蟲細胞系。這些細胞系,如Sf9和Sf21,由于其高轉(zhuǎn)染效率和支持強大病毒復(fù)制的能力,通常用于蛋白表達:如昆蟲sf9細胞表達、昆蟲sf21細胞表達。
     
 3.蛋白質(zhì)折疊和翻譯后修飾:昆蟲細胞擁有一種真核細胞機制,能夠進行適當?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊和譯后修飾,如糖基化和磷酸化。該系統(tǒng)對于生產(chǎn)需要這些修飾以獲得適當功能的復(fù)雜且具有生物活性的重組蛋白是特別有利的。
      
 4.高蛋白產(chǎn)量:昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)以其產(chǎn)生高產(chǎn)量重組蛋白的能力而聞名。桿狀病毒可以有效地感染昆蟲細胞并在其中復(fù)制,從而導(dǎo)致高水平的蛋白質(zhì)表達。該系統(tǒng)對難以在其他系統(tǒng)(如細菌或哺乳動物細胞)中表達的蛋白質(zhì)特別有益。
     
5.懸浮培養(yǎng):昆蟲細胞可以在懸浮培養(yǎng)中生長,從而可以大規(guī)模生產(chǎn)重組蛋白,懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)為大量生產(chǎn)蛋白質(zhì)提供了可擴展性和易操作性。

 6.安全性:昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)被認為是安全的,因為桿狀病毒是昆蟲特有的,不會感染脊椎動物,包括人類。昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)在生物安全方面提供了額外的優(yōu)勢,并避免了與基于哺乳動物細胞的表達系統(tǒng)相關(guān)的潛在風(fēng)險。
       
7.下游加工:昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)中產(chǎn)生的重組蛋白通常分泌到培養(yǎng)基中,簡化了下游加工。在收獲培養(yǎng)基后,可以使用各種色譜和過濾技術(shù)來純化蛋白質(zhì)。
       
8.蛋白質(zhì)復(fù)合物和多聚體蛋白質(zhì):昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)適用于生產(chǎn)蛋白質(zhì)復(fù)合物或多聚體蛋白,允許多個亞基的共表達或融合蛋白的產(chǎn)生,促進生物相關(guān)復(fù)合物的產(chǎn)生。
     
 9.靈活性:昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)在啟動子選擇、載體設(shè)計和基因表達調(diào)控方面提供了靈活性,允許使用強啟動子,如多面體啟動子,來驅(qū)動高水平的蛋白質(zhì)表達。
       
但是昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)也有其不可忽視的缺點:過程復(fù)雜且耗時;由于容納DNA量有限,會限制有效表達的基因或蛋白質(zhì)的大;盡管昆蟲細胞為蛋白質(zhì)表達提供了真核環(huán)境,但它們所進行的翻譯后修飾可能與哺乳動物細胞中的不同等。
     
總的來說,昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)是生產(chǎn)高產(chǎn)率和適當折疊的重組蛋白的有力工具,其進行翻譯后修飾的能力及其生物安全特性使其被廣泛選擇。
來源:卡梅德生物科技(天津)有限公司
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