CASY 3D無標記細胞分析儀在癌細毒性和化療敏感性中的應(yīng)用

CASY，不僅是細胞計數(shù)的利器，還在細胞存活率和毒性測量方面大顯身手。最新研究揭示了它在評估抗癌藥物的細胞毒性方面的潛力，為設(shè)計更有效的多藥治療方案帶來了新思路。

在最近的一項名為“CASY在癌細毒性和化療敏感性中的應(yīng)用——抗癌藥物組合治療癌癥”的研究中，CASY被用于評估抗癌藥物結(jié)合化療的細胞毒性，旨在設(shè)計具有更寬治療窗口的新型多藥治療方案。

研究案例：新藥物組合的細胞毒性評估
在Weinreich等人最近的一項研究中（1）。作者檢查了接受胃癌標準三聯(lián)藥物方案（ECF）以及新型雙聯(lián)藥物（D-D）多化療方案治療胃腺癌細胞系和非惡性細胞系。

使用CASY生長抑制測定評估了藥物組合的效果：400 μL稀釋后的細胞懸液重復(fù)測量三次，藥物的細胞毒性效應(yīng)被計算為實驗開始時活細胞數(shù)量與經(jīng)過各種藥物組合孵育5、10和14天后的細胞計數(shù)之間的相對比例。CASY評估窗口設(shè)置為僅包括活細胞，并且排除死細胞。

來自德國圖賓根大學(xué)醫(yī)院實驗?zāi)[瘤學(xué)的 J. Weinreich 博士：使用CASY進行細胞毒性測定能夠快速、簡單且可靠地評估抗癌藥物療法及其后續(xù)癌細胞系的化療敏感性。CASY的一個主要優(yōu)勢是通過簡單的細胞系特異性設(shè)置可以屏蔽分析中的碎片和死細胞，僅考慮活細胞及其聚集體。然而，由于記錄了細胞的完整狀態(tài)，所以死細胞和細胞碎片的數(shù)據(jù)在任何時候都是可用的。

1.體外生長曲線

圖1：ECF對于胃癌細胞系(MKN-45和23132/87)與非惡性細胞系(NHDF和23132/87)的生長抑制是劑量依賴型的,抑制效果不顯著

2.使用多種組合化療方案處理細胞14天后的增長率

圖2：單獨使用D-D來作用于胃癌細胞系MKN-45和23132/87，其抑制效果不顯著，而且對于非胃癌細胞系的NHDF和CCL-241作用不抑制反而促進。EC D-D對于胃癌細胞系MKN-45的抑制效果顯著，對于非胃癌細胞系的抑制效果不顯著

3.MKN45的細胞計數(shù)

圖3：Day 0，實驗開始。存活率=95.6%，活細胞濃度為2.7×10⁶/mL。圖解：LML:活細胞數(shù)/mL；VIA:%存活率；AGG:聚集；CL，CR：評估游標；NL，NR：標準化游標
 

圖4：Day 7,PBS對照組�；盥�=90.3%；活細胞濃度為7.6×10⁶ /mL
 

圖5：MKN45細胞計數(shù)的CASY截圖。Day 7，0.86 μmol/L D-D。活率=92.4%；活細胞濃度9.5×10⁵ /mL
 

圖6：使用EC D-D處理后的MKN-45細胞的細胞增長曲線。

red: E=0,37; C=0,45; D-D=0,41 μmol/L
pink: E=0,15; C=0,18; D-D=0,16 μmol/L
blue: E=0,075;C=0,09; D-D=0,082 μmol/L
yellow: PBS control

結(jié)果
評估新藥物組合。大體上，通過CASY分析能夠監(jiān)控細胞系對聯(lián)合藥物方案的類型和數(shù)量的特異性化學(xué)敏感性。一種新的雙聯(lián)藥物（D-D）（替代標準ECF組合中的5-FU）已顯示出對惡性胃腺癌細胞系的效果比對非惡性細胞系的效果更好，有望成為胃腺癌治療的前沿替代方案。

結(jié)論
CASY細胞計數(shù)和細胞毒性分析顯示，一種新的EC D-D抗癌藥物療法有望成為胃腺癌治療的前景替代方案，取代了標準的ECF三聯(lián)藥物組合。通過CASY分析，我們揭示了胃癌和非惡性細胞系對各種藥物組合的敏感性差異，從而評估了藥物混合物的抗癌潛力。

啟示
CASY分析的高度特異性化學(xué)敏感性為研究人員提供了深入了解藥物組合對不同細胞系影響的機會，為精準治療的發(fā)展貢獻力量。

參考文獻✦
1. Weinreich J, Archid R, Bajaeifer K, Hack A, Königsrainer A, Schott TC.Growth and Chemosensitivity of Gastric Adenocarcinoma and Non-Malignant Cell Lines in Response to Novel Anti-Cancer Drug Combinations. Chemotherapy. 2014; 60(5-6):346-352.

NCBI中的文獻索引號：DOI: 10.1159/000438943.