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磁微;瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)技術(shù)的原理及應(yīng)用

瀏覽次數(shù):742 發(fā)布日期:2024-6-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
磁微粒是指磁性納米粒子與無機(jī)或有機(jī)分子結(jié)合形成的可均勻分散于一定基液中具有高度穩(wěn)定性的膠態(tài)復(fù)合材料。在磁微粒表面或通過磁微粒表面的功能基團(tuán)將酶、抗體、寡核苷酸等生物活性物質(zhì)進(jìn)行固定,可進(jìn)一步用于酶的固定化、靶向藥物載體、細(xì)胞分選、免疫檢測(cè)、蛋白與核酸的分離純化及雜交檢測(cè)等領(lǐng)域。 

磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)是將磁性分離技術(shù)、化學(xué)發(fā)光技術(shù)、免疫分析技術(shù)三者結(jié)合起來的一種新興分析方法,該技術(shù)充分利用了磁性分離技術(shù)的快速易自動(dòng)化性,化學(xué)發(fā)光技術(shù)的高靈敏度性,以及免疫分析的特異性,在生物分析領(lǐng)域展現(xiàn)了不可替代的作用。目前,磁微粒化學(xué)分析免疫分析已經(jīng)應(yīng)用于管式化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)項(xiàng)目以及電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)項(xiàng)目。 傳統(tǒng)的免疫學(xué)檢測(cè)中以酶標(biāo)板為固相載體。而懸浮性磁微粒作為載體具有較高的比表面積,能夠更為充分地與樣品反應(yīng),加之外加磁場(chǎng)的靈活應(yīng)用,具有更高的靈敏度、更快的檢測(cè)速度和更好的重復(fù)性等優(yōu)點(diǎn)。

 根據(jù)免疫標(biāo)記物也即發(fā)光原理的不同,化學(xué)發(fā)光分析種類大致分為以下三類: 

一、直接化學(xué)發(fā)光采用吖啶酯、異魯米諾衍生物ABEI等作為示蹤物質(zhì)標(biāo)記抗原或抗體分子形成發(fā)光標(biāo)記物,采用納米微球?yàn)楣滔噍d體的分離方式,通過堿性液誘導(dǎo)結(jié)合標(biāo)記物發(fā)光,并通過測(cè)定發(fā)光強(qiáng)度實(shí)現(xiàn)對(duì)超微量物質(zhì)的定量分析。吖碇酯在不需要催化劑的情況下即可分解、發(fā)光。
主要優(yōu)點(diǎn):試劑穩(wěn)定性好,易于保存;標(biāo)記物為小分子,對(duì)標(biāo)記的抗原/抗體的空間位點(diǎn)幾乎不造成影響;本底低,靈敏度好,結(jié)果穩(wěn)定。

二、間接化學(xué)發(fā)光(酶促化學(xué)發(fā)光)用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(ALP)來標(biāo)記抗原或抗體,在與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原(或抗體)發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成固相包被抗體-待測(cè)抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物,經(jīng)洗滌后,加入底物(也就是發(fā)光劑),酶催化和分解底物發(fā)光。  
主要優(yōu)點(diǎn):發(fā)光過程中作為標(biāo)記物的酶基本不被消耗,發(fā)光信號(hào)強(qiáng)而穩(wěn)定,且發(fā)光時(shí)間較長(zhǎng);檢測(cè)方式簡(jiǎn)單、成本較低。 

三、電化學(xué)發(fā)光(羅氏專利)以電化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)砒錠釕標(biāo)記抗體(或抗原),以三丙胺(TPA)為電子供體,在電場(chǎng)中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng),它包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個(gè)過程。 
主要優(yōu)點(diǎn):可控的反應(yīng)體系,快速檢測(cè)時(shí)間,高精密度,高靈敏度,寬廣的檢測(cè)范圍;
用于化學(xué)發(fā)光免疫的磁性微球目前用于化學(xué)發(fā)光的磁微粒種類較多,但都有一些基本的要求,包括磁響應(yīng)快、單分散、粒徑均勻、懸浮度高、非特異性吸附低、批間穩(wěn)定等。目前最常用的為磁性聚苯乙烯(PS)微球。在全球市場(chǎng)上,磁微;瘜W(xué)發(fā)光試劑主要為跨國公司壟斷,其中ThermoFisher(Dynabeads)、JSR、Merk、GE等的磁性微球占有較大市場(chǎng)份額。近年來,國內(nèi)亦涌現(xiàn)出一些磁性微球較為出色的公司。羧基、氨基和鏈霉親和素磁珠是其中最常選用的表面功能化磁珠。



上海領(lǐng)駿生物科技有限公司成立于2016年,位于上海市青浦區(qū)張江云立方園區(qū)。公司長(zhǎng)期致力于生物領(lǐng)域內(nèi)相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售,產(chǎn)品主要包括磁性納米材料和磁珠法核酸提取純化試劑。公司一直堅(jiān)持以“質(zhì)量、誠信、團(tuán)結(jié)、奮進(jìn)”為宗旨,嚴(yán)格規(guī)范質(zhì)量管理體系,持續(xù)創(chuàng)新、精益求精,為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù),被認(rèn)定為國家級(jí)高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
 
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